[发明专利]矢车菊-3-O-葡萄糖苷的制备方法

权利要求书

1.一种制备矢车菊-3-O-葡萄糖苷的方法，该方法包括以下过程：

以紫色作物为原料，以体积分数为30-80％、pH值为1-4的乙醇水溶液为提取液对原料进行提取，提取温度为室温至65℃，提取物经过滤、浓缩得到花青素粗提物；

将所述花青素粗提物溶于水，使用截留分子量为1000-5000道尔顿的超滤膜进行超滤处理，对滤液冷冻干燥，得到分子量小于1000-5000道尔顿的滤液干粉；

将所述滤液干粉用水配制成0.05-1wt％的上柱液，上凝胶色谱柱初步纯化，用混合洗液洗脱，收集520nm处具有吸收峰的洗脱液，并保留其中的矢车菊-3-O-葡萄糖苷馏分，所述混合洗液为含酸0.1-5wt％的酸液∶有机溶剂＝4∶6-9∶1体积比的混合液；

将所述矢车菊-3-O-葡萄糖苷馏分用制备型HPLC进一步纯化，其中，采用C18制备色谱柱，柱温20-50℃，流速10-75mL/min，收集矢车菊-3-O-葡萄糖苷吸收峰。

2.根据权利要求1所述的方法，其中，所述紫色作物包括黑豆皮、紫玉米、紫玉米苞叶、黑米、紫甘薯、蓝莓、蔓越莓、欧洲越橘、黑加仑、草莓、李子、杨梅、木耳菜果实、紫豇豆、桑葚、红色结球菊苣、紫菜花、紫甘蓝或其混合物，将其植物组织破碎成为原料。

3.根据权利要求1所述的方法，其中，利用所述乙醇水溶液对原料提取的温度30-55℃，提取时间1-4小时。

4.根据权利要求1所述的方法，其中，所述原料提取物经过滤、浓缩后，实施喷雾干燥，得到粉末状花青素粗提物。

5.根据权利要求1所述的方法，其中，所述提取过程中，原料质量与提取液的体积比为1∶10-25(克/毫升)。

6.根据权利要求1所述的方法，其中，超滤处理时透膜压力2-4bar，流速控制0.5-50mL/min。

7.根据权利要求1所述的方法，其中，所述凝胶色谱柱选自Sephadex G-25柱、Sephadex LH-20柱、Sephadex G-20柱或Sephadex G-15柱。

8.根据权利要求1所述的方法，其中，上凝胶色谱柱实施初步纯化时所用的混合洗液中，所述酸包括甲酸、乙酸、三氟乙酸或磷酸或其混合，所述有机溶剂包括乙醇、甲醇、乙腈或正丁醇。

9.根据权利要求1或8所述的方法，其中，对凝胶色谱柱洗脱时的流速控制为20-50ml/min。

10.根据权利要求1所述的方法，其中，矢车菊-3-O-葡萄糖苷馏分用制备型HPLC进一步纯化时，流动相A为0.3-0.6％的甲酸水溶液，流动相B为0.3-0.6％的甲酸乙腈溶液。