[发明专利]高效表达普鲁兰酶的基因工程菌株及其构建方法

权利要求书

1.一种高效表达普鲁兰酶的基因工程菌株，其特征在于：所述基因工程菌株含有普鲁兰酶基因，普鲁兰酶基因基因的来源是Bacillus naganoensisATCC53909。

2.根据权利要求1所述的高效表达普鲁兰酶的基因工程菌株，其特征在于：所述基因工程菌株的宿主菌是大肠杆菌BL21(DE3)。

3.根据权利要求1所述的高效表达普鲁兰酶的基因工程菌株，其特征在于：所述基因工程菌株的普鲁兰酶基因由Bacillus naganoensis ATCC53909染色体DNA扩增得到的。

4.一种高效表达普鲁兰酶的基因工程菌株的构建方法，其特征在于：方法的步骤如下：

(1)基因克隆：根据NCBI上报道的基因序列设计引物，以Bacillus naganoensis(ATCC53909)菌株的染色体DNA为模板克隆得到普鲁兰酶基因；

(2)基因工程菌株的构建：将所获得的普鲁兰酶基因与载体pET-22b(+)连接，酶切验证；

(3)将酶切验证正确的载体转化到宿主E.coli BL21(DE3)内，之后进行酶切，测序验证，确定构建含有普鲁兰酶基因的基因工程菌株BL21(DE3)/pET22b-pul。

5.根据权利要求4所述的高效表达普鲁兰酶的基因工程菌株的构建方法，其特征在于：基因工程菌株BL21(DE3)/pET22b-pul经发酵所测粗酶液酶活力为10.94U/mg，比出发菌株Bacillus naganoensis ATCC53909酶活力提高了37倍。