[发明专利]一种野黄芩苷的纯化方法

说明书

技术领域

本发明属中药制备方法，涉及一种基于盐纯化工艺的野黄芩苷的纯化方法。

背景技术

野黄芩苷（Scutellarin）别名黄芩素苷、灯盏乙素、灯盏花乙素，其化学名称为4'-羟基黄芩素-7-O-葡萄糖醛酸甙，其植物来源有唇形科植物高黄芩(Scutellaria altissima L.)的叶，黄芩[S.baicalensis Georgi]的茎、叶以及半枝莲(S. Barbara D. Don)全草等。临床研究结果表明，野黄芩苷具有降低脑血管阻力，改善脑血循环、增加脑血流量及抗血小板凝集的作用，临床用于脑血管病后瘫痪的治疗。

虽然野黄芩苷（灯盏花乙素）对缺血性脑血管病及冠心病的治疗有非常明确的疗效，但是由于提取工艺的限制，目前灯盏花乙素制剂普遍存在纯度不高，疗效不稳定的情况。因此，近年来国内业界十分重视野黄芩苷（灯盏花乙素）的分离纯化新技术的研究。专利CN 101376669A 提出用大孔树脂柱分离野黄芩苷的工艺方法，该工艺将野黄芩苷溶解在碱水中，离心后滤液加入到D101大孔树脂柱上，通过大孔树脂洗脱，再用10倍量的丙酮抗溶剂结晶，得到灯盏花素盐。再将其盐用50%丙酮-水溶解，用酸调pH至酸性，得野黄芩苷。该方法虽然能够达到较理想的精制效果，但是工艺过程复杂，致使生产成本居高不下，同时也存在着安全隐患。专利CN 101830951 A则提出另一种用甲醇-DMF-水作为流动相制备液相色谱柱分离野黄芩苷的方法，所得产品虽然纯度比较高，但设备投资量大且生产成本，难以工业化应用。专利 CN 101497637公开了一种以灯盏花为原料制备高纯度野黄芩苷的方法。该方法将灯盏花经溶剂提取、絮凝剂澄清、大孔树脂分离和膜浓缩等步骤，最后采用有机溶剂沉淀方法得到野黄芩苷产品。该方法的不足之处在于，工艺繁长、操作难度大且产品质量不稳定。

由于野黄芩苷在常规的溶剂中的溶解度较小，采用溶剂重结晶的精制工艺难以提高工业设备的效率。这是现有的制备高纯度野黄芩苷技术的通病。专利CN 1715288A、CN1727355A和CN 1718584A分别提出了有机溶剂抗溶剂结晶纯化野黄芩苷的工艺方法。三种工艺虽然各有自己的特点，但技术路线相同，即用碱金属弱酸盐调pH，使目标产物的粗提物溶解，再用大量的甲醇、乙醇、丙酮等为抗溶剂，析出其盐结晶，然后通过碱溶酸沉工艺获得纯度较高的目标产物。上述抗溶剂工艺的缺陷在于：需要加入数倍体积的抗溶剂，有机溶剂用量大；而且碱性条件下，大量的甲醇或乙醇易于与鞣质发生缔合，致使结晶难以析出或结晶纯度不高。

发明内容

本发明针对现有野黄芩苷纯化技术过程复杂、有机溶剂用量大的不足之处，提出了一种新颖的纯化野黄芩苷的纯化方法，通过以下步骤实现：首先在一定温度下，将野黄芩苷粗品放入到一定量的溶剂中，用碱溶液调pH，直至野黄芩苷全部溶解于溶液中；然后通过蒸发或降温的方法析出结晶，过滤，洗涤，干燥，得到精制的野黄芩苷盐的中间体；重新选择溶剂，将结晶状中间体产品溶于其中，加入适当的酸性溶液，调节溶液的pH，使野黄芩苷盐转变为野黄芩苷形式并从溶液中析出；再经过滤、洗涤、干燥，得到野黄芩苷结晶。本发明所述野黄芩苷的分子结构为：

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本发明方法的具体步骤以下：

（1）在40~60℃下，将野黄芩苷粗品按重量体积比1:5~1:20g/mL加入溶剂溶液中，用质量浓度为5~20%的碱溶液调pH至8.0~9.0，使野黄芩苷全部溶解，然后在4~10℃下放置结晶，经36~48小时后，过滤，用水洗涤，干燥，得中间体野黄芩苷钠盐或钾盐的结晶；

（2）在10~35℃下，将野黄芩苷钠盐或钾盐的结晶，按重量体积比1:10~1:20g/mL加入到溶剂溶液中溶解，用质量浓度为5~20%的碱溶液调pH至8.0~9.0使盐全部溶解，再用质量浓度为5~10%的酸溶液调pH至1.5~2.5，放置4~6小时, 过滤，用水洗涤沉淀，干燥，得到纯化的野黄芩苷结晶。

步骤（1）所用的溶剂选用水、乙醇、乙酸乙酯或其混合物。所用碱溶液选用NaOH、NaHCO₃、Na₂CO₃、KOH、KHCO₃、K₂CO₃、磷酸盐、氨水或碱性氨基酸溶液。析出结晶态中间体的结晶方法包括降温结晶或溶剂蒸发结晶或抗溶剂结晶方法。