[发明专利]脂肪胺链修饰的抗肿瘤寡肽及其合成方法和应用

说明书

技术领域

本发明涉及式如Leu-Pro-Asn-Ile-Ser-Lys-Pro-NHCH₂(CH₂)nCH₃(式中n为6、8、10、12、14或16)的6种寡肽，涉及它们的制备方法，进一步涉及它们在细胞模型和小鼠S180模型上的抗肿瘤作用及抗粘附作用及应用，本发明属于生物医药领域。

背景技术

恶性肿瘤作为一种复杂的疾病，严重危害着人民生命健康，如何有效有力地治疗肿瘤得到了越来越多学者的关注和研究。目前，化学治疗仍然是临床治疗肿瘤的主要手段，寻找抗肿瘤药物是新药研究的热点之一。发明人了解，七肽LPNISKP能抑制肝癌细胞的运动与侵袭，显著降低肝内及肺转移率，并可降低肿瘤微血管密度，这些结果提示了七肽LPNISKP及其修饰物作为抗侵袭及抗肿瘤剂的临床应用前景。已知肿瘤细胞运动与侵袭的首要步骤是粘附，这也提示了七肽LPNISKP及其修饰物具有抗肿瘤细胞粘附的潜能。按照一般的认识，含多肽的两亲性分子，例如脂肪胺链修饰的多肽，在适当的条件下通过分子间非共价键相互作用可发生自组装，形成纳米结构。借助纳米结构可改善多肽在体内的输送、延缓多肽在体内的降解速率和提高多肽的体内活性。根据这些认识，发明人提出了本发明。

发明内容

本发明的第一个内容是提供脂肪胺链修饰的抗肿瘤寡肽，如下式：

Leu-Pro-Asn-Ile-Ser-Lys-Pro-NHCH₂(CH₂)_nCH₃

其中，n为6、8、10、12、14或16。

本发明的第二个内容是提供所述寡肽的制备方法，是通过以下技术方案来实现的：

(1)将保护基保护的脯氨酸(Pro)与饱和脂肪胺缩合，所述饱和脂肪胺为CH₃(CH₂)_nCH₂NH₂，n＝6、8、10、12、14或16；

(2)脱去保护基后，再按照现有液相合成技术，逐步接肽合成保护基保护的Ser-Lys-Pro-NHCH₂(CH₂)_nCH₃；

(3)按照现有液相合成技术，逐步接肽合成保护基保护的Leu-Pro-Asn-Ile；

(4)将保护基保护的Leu-Pro-Asn-Ile与保护基保护的Ser-Lys-Pro-NHCH₂(CH₂)nCH₃缩合后脱去保护基得到目标化合物。

其中所述保护基包括N端保护基、C端保护基或侧链保护基，所述N端保护基是对多肽的N端进行保护时常用的保护基团，例如可以是叔丁氧羰基(Boc)、苄氧羰基(Z)；C端保护基是对多肽的C端进行保护时常用的保护基团，例如可以是甲氧基(OMe)、苄氧基(OBzl)；所述侧链保护基是对多肽侧链进行保护时常用的保护基团，例如可以是苄基(Bzl)、苄氧基(OBzl)、硝基(N0₂)、苄氧羰基(Z)；所述液相合成技术及涉及的保护、缩合、脱保护的过程是本领域的常规并公知的技术。

其中缩合反应是在二环己基碳二亚胺(DCC)和N-羟基苯并三氮唑(HOBt)存在下于无水THF中进行；脱去N端保护基如Boc是在含氯化氢的乙酸乙酯中进行或如Z是在甲醇中发生氢解；脱去C端保护基如OBzl是在甲醇中进行皂化；脱去侧链保护基如Z、OBzl、NO₂是在甲醇中发生氢解。

具体的，合成路线如图2所示，按照如下步骤制备：

1)在二环己基碳二亚胺(DCC)和N-羟基苯并三氮唑(HOBt)存在下Boc-Pro在无水THF中与饱和脂肪胺NH₂CH₂(CH₂)_nCH₃脱水形成Boc-Pro-NHCH₂(CH₂)_nCH₃；其中n为6、8、10、12、14或16；