[发明专利]一种定量检测炭疽芽孢的磁性免疫层析试纸条及制备方法

权利要求书

1.一种定量检测样品中炭疽芽孢的磁性免疫层析试纸条，该试纸条由底板（1）、硝酸纤维素膜（6）、结合垫（3）、样品垫（2）及吸收垫（7）构成，其特征在于：硝酸纤维素膜（6）上预包被有炭疽芽孢检测线（4）和质控线（5），粘贴于底板（1）上的第一层为硝酸纤维素膜（6），硝酸纤维素膜（6）靠近检测线（4）的一端粘贴有结合垫（3）第二层，另一端粘贴有吸收垫（7）第二层，结合垫（3）远离硝酸纤维素膜（6）的一端上粘贴有样品垫（2）第三层，三层之间相互交错2.5mm，试纸条装入卡板（9）中，通过卡板（9）的加样孔（8）加入样品。

2.根据权利要求1所述的一种定量检测样品中炭疽芽孢的磁性免疫层析试纸条，其特征在于：所述的底板为98mm，硝酸纤维素膜为25mm，结合垫为结合有炭疽芽孢抗体偶联的超顺磁颗粒的8mm，样品垫为22mm，吸收垫为29mm。

3.权利要求1所述的一种定量检测样品中炭疽芽孢的磁性免疫层析试纸条的制备方法，其步骤是：

A、抗体的制备：采用标准B淋巴细胞杂交瘤技术制备两种针对炭疽芽孢表面EA1蛋白的单克隆抗体，并用正辛酸-饱和硫酸铵沉淀法对制备出的抗体进行纯化；

B 、抗体偶联超顺磁颗粒的制备：选用直径为100-300 nm的超顺磁颗粒，使用碳二亚胺和琥珀酰亚胺共价偶联的方式将针对炭疽芽孢表面蛋白的单克隆抗体共价交联到超顺磁颗粒上，交联后的超顺磁颗粒用BSA封闭；

C、将制备好的抗体偶联磁颗粒使用定量喷液装置以10 μl/cm-20 μl/cm的量喷涂于结合垫上；

  D、硝酸纤维素膜的包被：使用包被缓冲液将针对炭疽芽孢表面蛋白的单克隆抗体以及羊抗小鼠IgG稀释到0.5-2 mg/ml浓度，使用定量喷液装置分别将二者以0.4-0.8cm的间隔喷印于硝酸纤维素膜上，晾干后于干燥处封存备用，保存温度为4℃至25℃，避免阳光直射；

  E、试纸条的组装：在底板上依次相互交错2.5mm地贴上包被有抗体的硝酸纤维素膜、磁颗粒结合垫、样品垫、吸收垫，然后根据要求宽度切割即得到试纸条。