[发明专利]一种新的检测稗草对二氯喹啉酸抗药性的方法无效
| 申请号： | 201110154159.5 | 申请日： | 2011-06-09 |
| 公开（公告）号： | CN102242201A | 公开（公告）日： | 2011-11-16 |
| 发明（设计）人： | 李岗;吴声敢;吴长兴;赵学平;王强;陈丽萍;苍涛;俞瑞鲜;任海英 | 申请（专利权）人： | 浙江省农业科学院 |
| 主分类号： | C12Q1/68 | 分类号： | C12Q1/68 |
| 代理公司： | 杭州赛科专利代理事务所 33230 | 代理人： | 陈辉 |
| 地址： | 310021 *** | 国省代码： | 浙江;33 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 检测 稗草 氯喹 抗药性 方法 | ||
1.一种检测稗草对二氯喹啉酸抗药性的方法，包括：
在待检测的稗草和对照稗草上处理二氯喹啉酸；检测稗草GH3基因在转录水平的表达量；把GH3基因的表达量与对照处理的GH3基因的表达量进行比较；比较的结果来进行待检测的稗草对二氯喹啉酸的抗药性评价。
2.根据权利要求1所述的方法，其中，以稗草actin为内参对照，待检测的稗草GH3基因在转录水平的相对表达量大于100的为抗二氯喹啉酸类型。
3.根据权利要求2所述的方法，其中，当使用常规用量的二氯喹啉酸在用药窗口期处理稗草后，在1小时内待检测的稗草体内GH3的表达量升高幅度小于1.5倍，在2小时至5天内其体内GH3的表达量升高幅度为0.2～1倍；在第6天其体内的GH3的表达量升高幅度为2～3倍的为抗二氯喹啉酸类型。
4.根据权利要求1所述的方法，其中，以稗草actin为内参对照，待检测的稗草GH3基因在转录水平的相对表达量小于50的为感二氯喹啉酸品种。
5.根据权利要求4所述的方法，其中，使用常规用量的二氯喹啉酸在用药窗口期处理稗草后，在1小时内待检测的稗草体内GH3的表达量升高幅度大于4.5倍，在2小时至3天内其体内GH3的表达量升高幅度为0.3～1.5倍。；在第4和第6天其体内GH3的表达量升高幅度在2～3倍，在第5天其体内二氯喹啉酸的表达量升高幅度大于16倍的为感二氯喹啉酸类型。
6.根据权利要求1所述的方法，其中，以稗草actin为内参对照，待检测的稗草GH3基因在转录水平的相对表达量介于50～100为二氯喹啉酸敏感和抗性的中间类型。
7.根据权利要求6所述的方法，其中，使用常规用量的二氯喹啉酸在用药窗口期处理稗草后，在1小时内待检测的稗草体内GH3的表达量升高幅度介于于1.5～4.5倍的为二氯喹啉酸敏感和抗性的中间类型。
8.根据权利要求1-7之一所述的方法，其中，所述的稗草的GH3为SED IN NO：29，以及依此序列设计的引物。
9.根据权利要求8所述的方法，其中，检测所述待检测稗草GH3基因表达的方法为Real-Time PCR，引物为序列SED IN NO：31和SED IN NO：32。
10.根据权利要求9所述的方法，其中，检测所述对照稗草GH3基因表达的方法为Real-Time PCR，引物为序列SED IN NO：33和SED IN NO：34。
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