[发明专利]一种叶酸-羧甲基壳聚糖修饰pH敏感多柔比星纳米脂质体

说明书

技术领域

本发明涉及一种叶酸-羧甲基壳聚糖修饰pH敏感多柔比星纳米脂质体及其制备方法。

背景技术

多柔比星(Doxorubicin)，又俗称阿霉素，羟柔红霉素，是临床上常用的抗生素类抗肿瘤药，抗癌谱广，疗效广，可治疗多种肿瘤，但该药对心脏具有严重的毒副作用，尤其是严重的心脏损害，骨髓抑制等副反应限制了它在临床上的应用。多年来，各国科学家一直在寻找着降低其毒副反应的有效方法，如调整给药方案，研制心脏毒性低的阿霉素类似物，联合用药以及改变药物剂型的方式来减轻其严重的心脏毒性。脂质体包裹阿霉素比游离药物的毒性降低50-70％(Budai M，et al.Liposomes as drug carrier systems：preparation，classification and therapeutic advantages of liposomes.Acta Pharm Hung.，2001，71(1)：114-8.)但是脂质体由于其易被巨噬细胞吞噬，在正常组织中的含量依然很高，为了进一步降低阿霉素脂质体的药物毒性，利用靶向物质或粒子对脂质体表面或内部进行修饰，使得脂质体克服药物在体内输送过程中所遇到的各种生理屏障，将药物送到特定的靶位，提高药物的靶向性。pH敏感性脂质体就是其中的一种，利用肿瘤组织在局部缺血时，肿瘤间质液会出现异常酸化现象，pH值比正常组织低，利用这一特性科学家采用了不同方法进行了表面修饰，如在脂质体表面嫁接具有pH敏感的生物高分子材料或使用具有pH敏感性的磷脂材料来制备脂质体。

羧甲基壳聚糖(CMCT)是壳聚糖经羧甲基化反应后生成的一种水溶性衍生物，其性质稳定，生物相容性和可降解性好，毒性较小。它既含有弱碱阳离子(-NH₃⁺)基团，又含有弱酸阴离子(-COO^-)基团，是一种两亲性聚电解质。由于其具有pH敏感，在不同的pH值条件下，其链段的构象不同，利用这一特性，将羧甲基壳聚糖修饰到脂质体表面，使得在不同pH值下由于构象不同其作用力将脂质体内包裹的药物释放，达到pH敏感。仝新勇等(羧甲基壳聚糖修饰对紫杉醇自组装前体脂质体大鼠体内组织分布的影响.中国天然药物，2007，5(1)：45-49)利用这一规律进行了紫杉醇脂质体的修饰并对其药代分布进行了研究，研究结果表明，在添加羧甲基壳聚糖进行表面修饰后，大鼠的体内配置发生了明显的变化，肝、脾、肺、卵巢、子宫等的药物摄取量明显增加。

纳米级药物载体的靶向形式以被动靶向为主，即利用载体的疏水性(或亲水性)、静电作用、载体的大小、质量、pH值等理化因素容易被位于肝、脾、肺及骨髓的单核、巨嗜细胞系统摄取，增强抗肿瘤药物对位于单核吞噬细胞系统的肿瘤的化疗效果。为了加强靶向作用，可以设计具有主动靶向作用的纳米粒，通过靶向分子与细胞表面特异性受体结合，使药物能够准确送到肿瘤细胞中，实现恶性肿瘤的靶向治疗。由于叶酸受体在肿瘤细胞外膜的过度表达，已经确知肿瘤细胞与叶酸之间有特殊的密切关系。当叶酸通过侧基连接于羧甲基壳聚糖的羧基(叶酸-羧甲基壳聚糖)，其依旧保持正常的受体亲和力，因此可以通过受体胞吞作用被内在化。且叶酸受体在多种人类肿瘤细胞的过度表达也为特效药物对肿瘤的靶向提供了一种有效方式(Sumanta K.，et al. In vitro evaluation of folic acid modified carboxymethyl chitosan nanoparticles loaded with doxorubi

发明内容

本发明的目的是公开一种叶酸-羧甲基壳聚糖修饰pH敏感纳米多柔比星脂质体及其制备方法。叶酸-羧甲基壳聚糖修饰pH敏感纳米多柔比星脂质体由盐酸多柔比星、卵磷脂、胆固醇、维生素E、叶酸-羧甲基壳聚糖等作为组分制备而成。

本发明叶酸-羧甲基壳聚糖修饰pH敏感纳米多柔比星脂质体，由下列质量分数比的组分组成：

其中，优选的是由下列质量份数比的成分组成：

本发明叶酸-羧甲基壳聚糖修饰pH敏感纳米多柔比星脂质体的制备包括以下步骤：

(1)按配方称取相应的磷脂、胆固醇和维生素E放入适当容器中，然后加入无水乙醇超声震荡溶解成溶液，将此溶液转入旋转蒸发器中；在40℃水浴旋转蒸发去除有机溶剂，成膜；加入缓冲溶液(pH＝4.0)进行洗膜、水化，间隔0.5h超声一次，水化2h，制得空白脂质体；