[发明专利]一种胃癌治疗疗效判断的方法、试剂盒及其使用方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种胃癌治疗疗效判断的方法、试剂盒及其使用方法。

背景技术

胃癌是最高发的癌症之一，每年约有新发病例87万和死亡病例65万。胃癌早期治疗效果好，但诊断难；晚期易于诊断，但是治愈难度大。早期胃癌诊断率小于15％，多数胃癌一经诊断即为晚期。

诊断胃癌常用的胃镜技术近年来有显著发展，如胃粘膜染色内镜使用的不吸收染料(如靛兰胭脂红)，胃癌组织着色率在90％以上，提高胃癌的检出率；放大胃镜(可以放大80倍)有助于在微血管水平评估胃部病变；红外线视频内镜的红外线可以穿透组织深部，获得组织的粘膜下特征；电子超声内镜能够清晰地显示正常胃壁的5层、7层或9层的声像，通过声像图形的改变，可具体辨别出肿瘤粘膜浸润程度，对早期胃癌诊断正确率可达88-99％。

然而胃镜检查价格较贵，同时也给患者带来不少痛苦，急需开发价廉、舒适、适合胃癌诊断的方法。基因诊断将是胃癌诊断突破口，现已发现癌基因ras、c-met、p16、cerb、p53、及端粒酶活性与胃癌有一定关系。但这些指标对胃癌缺乏特异性，目前有潜在临床应用价值血清学检测癌前病变或胃癌的方法正在摸索研究中。

miRNA是一类非编码的长约20～22个核苷酸的RNA，是miRNA前体经过RNaseIII酶Dicer加工形成的miRNA双链。双链中的一条与沉默复合体(RISC)连在一起，另一条被细胞内的核酸酶降解。miRNA-RISC复合体结合到特定mRNA目标，导致mRNA翻译抑制或裂解。因此，miRNA通过促进RNA降解，抑制mRNA翻译，或者影响转录来调节蛋白的表达。虽然miRNA介导的mRNA降解也发生在哺乳动物中，但大多数哺乳动物的miRNA被认为是通过mRNA3′-非编码区不完善的碱基配对(3′-非翻译区)在转录水平上抑制了目的基因的表达。这种形式的翻译调控诱导蛋白质合成的快速变化，而不需要mRNA加工过程中大量的转录激活和后续步骤，因此提供了对特定蛋白表达更精确、直接和节能的控制方式。此外，基因表达的翻译控制有容易逆转的优势，为细胞应对各种压力提供了很大的灵活性。

miRNA已被证实参与调控了包括时序发育、细胞凋亡脂肪代谢、神经元发育、细胞分化、激素分泌等在内的多种生理过程。此外，miRNA与癌症发生密切相关。癌症是由受损细胞增殖失控或不适当存活引起的。正常细胞已形成保护功能，以确保细胞的分裂、分化和死亡过程正确且协调地进行。当指导细胞增殖和分化的基因受到损伤时，癌症就发生了。而miRNA发挥类似致癌基因或抑癌基因的作用，参与癌症的发生、发展。(Micro RNAs genomics biogenesis mechanism，and funection[J].Cell，2004，116(2)：281-297)位于13q14的miR-15以及miR-16在B细胞慢性淋巴白血病中表达水平下调；miR-143与miR-145在直肠癌中表达水平下调；let27在肺癌样本中表达水平下调，并与预后正相关；miR-125b，miR-145，miR-155，miR-21在乳腺癌中表达水平明显下调。(姜洁纯，汤华.微小RNAs与肿瘤关系的研究进展.医学综述，2008，14(07)：1005-1006)研究人员发现另有一些miRNA在肿瘤样本中表达水平上调，如由miR-17，miR-18，miR-19等在肺癌样本中表达水平上调，miR-155的前～Burkitt淋巴瘤表达水平上调。随着研究的深人，研究人员发现一些miRNA在细胞调控中扮演着“双刃剑”的作用，如miR-21在乳腺癌样本中表达水平明显下调，而在神经胶质瘤中表达水平明显上调(叶萍，于凤海.MicroRNAs与肝癌.第二军医大学学报，2008，29(05)：561-564.)

MiRNA在不同的癌症细胞中具有特定的表达水平和模式，人们可以通过对人乳腺癌、肺癌、结直肠癌、颅脑肿瘤、甲状腺癌和淋巴瘤等组织中的miRNA表达谱与正常的组织表达谱进行对比分析，对不同癌症特定的miRNA水平进行鉴定，从而有助于癌症的临床管理。

发明内容

本发明要解决的技术问题在于在于提供一种能判断胃癌治疗疗效的方法，准确判断患者是否能从治疗方案中获益，帮助判断使用何种治疗方法，从而避免对无应答患者的毒性、降低病人的医疗成本。

为解决上述技术问题，本发明提供了一种判断胃癌治疗疗效的方法：检测胃癌组织中miR-21和/或miR-181b表达水平。