[发明专利]一株微生物菌株及其应用

权利要求书

1.一种微生物菌株，其特征在于：它为微杆菌Microbacterium sp.GYC29，保藏号为CCTCC NO：M2010311；菌落黄色，表面光滑不透明边缘整齐；革兰氏阳性，最适生长温度为25-30℃。

2.如权利要求1所述的微生物菌株，其特征在于：所述菌株通过如下途径获得：

首先从土壤或者烟叶中分离出降解烟草烟碱的微生物菌株；然后将获得的微生物菌株用烟碱选择培养基进行筛选，经分离纯化和耐受烟碱能力试验，获得可以高效降解烟碱的菌株，即微杆菌Microbacterium sp.GYC29。

3.如权利要求1或2所述的微生物菌株，其特征在于：所述菌株的培养步骤为：

A、斜面培养：蛋白胨10g，酵母膏5g，氯化钠10g，琼脂15g，蒸馏水1000ml，pH7.0，将冷冻保存的甘油悬液接种到斜面培养基上，30℃恒温培养2天；

B、摇瓶培养：烟碱2g，蛋白胨5g，酵母膏5g，氯化钠5g，K₂HPO₄·3H₂O 13.3g，KH₂PO₄ 4g，MgSO₄·7H₂O 0.2g，0.5ml微量元素，加蒸馏水1000ml，调pH值为7.0，高压蒸汽灭菌；摇瓶装液量为10～30v/v％，接种量为2～10v/v％，培养温度为20～40℃，摇床转速为100～200rpm，摇瓶培养1～3天，烟碱降解率达到85～100％。

4.如权利要求3所述的微生物菌株，其特征在于：所述微量元素为：CaCl₂ 0.04g，CuSO₄ 0.07g，MnSO₄·H₂O 0.008g，FeSO₄·7H₂O 0.004g，Na₂MoO₄·2H₂O 0.1g，加0.1mol·L^-1的HCl溶解定容100ml。

5.权利要求1所述的一株微生物菌株的应用，其特征在于，所说微杆菌Microbacterium sp.GYC29用于降解烟草中的烟碱；所说的用于降解烟草中的烟碱，通过如下步骤获得：

A、将权利要求1所述的微杆菌Microbacterium sp.GYC29进行发酵培养，获得发酵液及菌体；

B、将步骤A所得的发酵液或菌体用水、生理盐水或者缓冲液进行稀释，稀释后菌液浓度达到10⁶～10¹²个菌/ml，将菌液按照烟叶重量的1～5％，加入到含水量为10～50％的烟草中进行发酵，发酵温度为10～50℃，发酵时间不低于4小时。

6.如权利要求5所述的微生物菌株的应用，其特征在于，其中步骤A中所说的缓冲液为巴比妥缓冲液、邻苯二甲酸盐缓冲液、氨-氯化铵缓冲液、硼砂-氯化钙缓冲液、醋酸-醋酸钠缓冲液、醋酸-醋酸铵缓冲液、柠檬酸盐缓冲液或磷酸盐缓冲液中的任意一种。