[发明专利]蝴蝶兰FT基因的cDNA序列及其编码的氨基酸序列无效
申请号: | 201110158978.7 | 申请日: | 2011-06-14 |
公开(公告)号: | CN102250922A | 公开(公告)日: | 2011-11-23 |
发明(设计)人: | 李冬梅;朱根发;吕复兵;孙映波;操君喜 | 申请(专利权)人: | 广东省农业科学院花卉研究所 |
主分类号: | C12N15/29 | 分类号: | C12N15/29;C07K14/415;C12Q1/68 |
代理公司: | 广州三环专利代理有限公司 44202 | 代理人: | 王会龙;郝传鑫 |
地址: | 510640 广*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 蝴蝶兰 ft 基因 cdna 序列 及其 编码 氨基酸 | ||
1.一种分离出的蝴蝶兰FT基因的cDNA序列,其特征在于,具有如SEQ ID NO:1所示的核苷酸序列。
2.如权利要求1所述的蝴蝶兰FT基因的cDNA序列,其特征在于,该cDNA序列包含5’端非编码区1bp-58bp、蛋白编码区59bp-589bp和3’端非编码区590bp-809bp,编码包含176个氨基酸的多肽。
3.一种如权利要求1或2所述蝴蝶兰FT基因的cDNA序列编码的多肽,其特征在于,具有如SEQ ID NO:2所示的氨基酸序列。
4.一种用于检测蝴蝶兰FT基因在低温诱导出的蝴蝶兰花芽的不同发育阶段的表达量的方法,其特征在于包括如下步骤:
分别提取了不同发育阶段的蝴蝶兰花芽的总RNA,再将不同花芽的RNA分别反转录为cDNA第一链;
根据核苷酸序列SEQ ID NO.1,设计如下引物作为Real-time PCR的引物来扩增目的片段长为120bp的特异区段:
FT-F:5’- ACCGCTTTGTCTTCGTGCTG-3’ <SEQ ID NO.3>,
FT-R:5’- CGACTGGCGAACCGAGATTA-3’<SEQ ID NO.4>,
以蝴蝶兰的actin(AY134752.1)作为内参基因,设计特异引物:
actin-F:5’- CAGTGTTTGGATTGGAGGTT-3’ <SEQ ID NO.5>,
actin-R:5’- TCTCGGGTTCCATTTCCATC-3’ <SEQ ID NO.6>,
扩增长为139 bp目的片段;
根据Real-time PCR试验结果,获得FT基因在低温诱导出的蝴蝶兰花芽的不同发育阶段的表达量。
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