[发明专利]一株生产莽草酸的重组大肠杆菌及其构建方法无效
申请号: | 201110163364.8 | 申请日: | 2011-06-17 |
公开(公告)号: | CN102250874A | 公开(公告)日: | 2011-11-23 |
发明(设计)人: | 方宏清;邹永康;陈凯;孙旭;蔡钒;戴红梅;李树龙;周长林 | 申请(专利权)人: | 中国人民解放军军事医学科学院生物工程研究所;中国药科大学 |
主分类号: | C12N15/09 | 分类号: | C12N15/09;C12N15/63;C12N1/21;C12P7/42;C12R1/19 |
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地址: | 100071 北*** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 生产 莽草 重组 大肠杆菌 及其 构建 方法 | ||
1.一种生产莽草酸的重组大肠杆菌的构建方法,其特征首先在于敲除了ydiB基因。
2.如权利要求1所述,此种生产莽草酸重组大肠杆菌的构建方法,其特征还在于敲除了ptsHIcrr操纵子。
3.如权利要求1-2所述,此种生产莽草酸重组大肠杆菌的构建方法,其特征还在于敲除aroL基因。
4.如权利要求1-3所述,此种生产莽草酸重组大肠杆菌的构建方法,其特征还在于敲除aroK基因。
5.如权利要求1-4所述,此种生产莽草酸重组大肠杆菌的构建方法,其特征还在于敲除shiA基因。
6.如权利要求1-5所述,此种生产莽草酸重组大肠杆菌的构建方法,其特征还在于其染色体上整合了由L-阿拉伯糖调控表达的T7RNA聚合酶基因。
7.如权利要求1-6所述,此种生产莽草酸重组大肠杆菌的构建方法,其特征还在于其菌体内转化了重组表达低拷贝质粒pAOC-TGEFB。
8.如权利要求7所述,重组表达质粒pAOC-TGEFB包含有莽草酸代谢途径中的关键基因tktA、glk、aroE、aroF以及aroB。
9.如权利要求8所述,其特征在于,所述重组表达低拷贝质粒pAOC-TGEFB所含的tktA、glk、aroE、aroF以及aroB基因均带有T7启动子。
10.如权利要求1-7所述,以此方法构建获得生产莽草酸的重组大肠杆菌菌株,其特征在于,其在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心保藏的保藏号为:CGMCC No.4631。
11.如权利要求10所述重组工程菌,其特征在于该工程菌为大肠杆菌DH5α。
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