[发明专利]一种鉴定耐盐棉花的方法及专用SSR标记

权利要求书

1.一种用于辅助鉴定耐盐棉花的引物组合物，为如下中任意一种：

(1)HAU1918、HAU1058和TMB1288

(2)HAU1918、NAU1085和HAU773

(3)HAU1918、HAU1058和NAU1085

(4)HAU1918、HAU1058和TMB1288

(5)HAU1918、HAU1058、HAU773和NAU1085

(6)HAU1918、NAU1085、HAU773和TMB1288

(7)HAU1918、HAU1058、NAU1085和TMB1288

(8)HAU1918、HAU1058、HAU773、NAU1085和TMB1288

(9)HAU1918和TMB1288

(10)NAU1085和TMB1288

(11)HAU773和TMB1288

(12)HAU1058和TMB1288；

所述HAU1918的一条引物序列如SEQ ID NO：3所示，另一条引物序列如SEQ ID NO：4所示；

所述HAU1058的一条引物序列如SEQ ID NO：5所示，另一条引物序列如SEQ IDNO：6所示；

所述TMB1288的一条引物序列如SEQ ID NO：1所示，另一条引物序列如SEQ IDNO：2所示；

所述NAU1085的一条引物序列如SEQ ID NO：7所示，另一条引物序列如SEQ IDNO：8所示；

所述HAU773的一条引物序列如SEQ ID NO：9所示，另一条引物序列如SEQ ID NO：10所示。

2.权利要求1所述引物组合物在辅助鉴定耐盐棉花中的应用。

3.一种辅助鉴定耐盐棉花的方法，包括如下步骤：

分别用权利要求1所述引物组合物中的每对引物对待测棉花单株进行PCR扩增，获得PCR扩增产物，对所述PCR扩增产物进行检测，根据如下方法确认所述待测棉花单株为耐盐棉花还是盐敏感棉花：

若所述引物组合物对应的所有PCR扩增产物中含有耐盐特征带T且无敏盐特征带S1，则确认所述待测棉花单株候选为耐盐棉花；

若所述引物组合物对应的所有PCR扩增产物中含有敏盐特征带S1，则确认所述待测棉花候选为盐敏感棉花；

若所述引物组合物对应的所有PCR扩增产物中不含有敏盐特征带S1也不含有任何耐盐特征带T，则确认所述待测棉花候选为盐敏感棉花；

所述敏盐特征带S1为60bp的DNA；

所述耐盐特征带T为T4、T3A、T3B、T5和T2中的至少一种；

所述T4为210bp的DNA；所述T3A为280bp的DNA；所述T3B为240bp的DNA；所述T5为220bp的DNA；所述T2为160bp的DNA。

4.根据权利要求3所述的方法，其特征在于：所述PCR扩增的体系由10×PCRbuffer、dNTP、Taq DNA聚合酶、SSR标记中的一条DNA分子、SSR标记中的另一条DNA分子和模板DNA组成；dNTP在体系中的浓度为0.2mmol/L，Taq DNA聚合酶在体系中的浓度为0.05U/μl，SSR标记中的一条DNA分子在体系中的浓度为0.5μmol/l，SSR标记中的另一条DNA分子在体系中的浓度为0.5μmol/l，模板DNA在体系中的浓度为5.0ng/μl。

5.根据权利要求3或4所述的方法，其特征在于：所述对所述PCR扩增产物进行检测的方法为测序或非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳。

6.一种辅助鉴定耐盐棉花的方法，包括如下步骤：

取待测棉花的15个单株，按照权利要求3-5中任一所述方法对每株棉花进行检测，若15个单株中有8株以上被鉴定为耐盐棉花，则确认所述待测棉花候选为耐盐棉花；若15个单株中有7株以下被鉴定为盐敏感棉花，则确认所述待测棉花候选为盐敏感棉花。

7.根据权利要求6所述的方法，其特征在于：所述待测棉花为棉花常规种或棉花杂交种。

8.权利要求3-7中任一所述方法在耐盐棉花品种的选育中的应用。

9.权利要求3-7中任一所述方法在棉花的遗传育种中的应用。