[发明专利]班克木培养基及组织培养与快速繁殖方法

权利要求书

1.一种改良WPM培养基，包含下列元素成分：NH₄NO₃，200～400mg/L；Ca(NO₃)₂₄H₂O，250～600mg/L；KCl，400～900mg/L；CaCl₂₂H₂O，90～200mg/L；MgSO₄，180～400mg/L。

2.一种用于班克木组织培养的腋芽诱导培养基，其元素成分包括：在权利要求1所述改良WPM培养基的基础上添加生长调节剂；所述生长调节剂选自：0.5～1.5mg/l IBA、0.5～1.5mg/l 6-BA、0.5～1.5mg/l NAA、0.05～0.15mg/l 2，4-D和0.1～0.3mg/l TDZ中的任一种或多种。

3.一种用于班克木组织培养的生根培养基，其元素成分包括：在权利要求1所述改良WPM培养基的基础上添加生长调节剂和活性炭；所述生长调节剂选自：0.5～1.5mg/l IAA、0.5～1.5mg/l IBA、0.5～1.5mg/l KT和0.5～1.5mg/l NAA中的任一种或多种。

4.一种班克木组织培养与快速繁殖方法，包括如下步骤：外植体的消毒和无菌苗的获得，腋芽诱导和继代培养，生根培养和试管苗移栽；其中无菌苗的获得，腋芽诱导和继代培养及生根培养阶段所用培养基包括权利要求1所述的改良WPM培养基。

5.根据权利要求4所述的班克木组织培养与快速繁殖方法，其特征在于，在每个步骤中：光照条件为自然散射光2500～3000Lux加人工辅助光2000～2500Lux，光照时间为14h/d。

6.根据权利要求4所述的班克木组织培养与快速繁殖方法，其特征在于，所述无菌苗的获得，腋芽诱导和继代培养及生根培养阶段的培养温度为20～23℃，试管苗移栽的移栽温度为18～25℃。

7.根据权利要求4所述的班克木组织培养与快速繁殖方法，其特征在于，无菌苗的获得包含外植体的接种和接种后的继代培养，接种所用培养基为MS培养基；接种后继代培养所用培养基为所述改良WPM培养基；所用每个培养基的pH值均为5.9～6.0。

8.根据权利要求4所述的班克木组织培养与快速繁殖方法，其特征在于，腋芽诱导和继代培养所用培养基为班克木腋芽诱导培养基或添加生长调节剂的MS培养基；生根培养所用培养基为班克木生根培养基；所用每个培养基的pH值均为5.9～6.0；所述生长调节剂为0.5～1.5mg/l IBA、0.5～1.5mg/l 6-BA、0.5～1.5mg/l NAA、0.05～0.15mg/l 2，4-D和0.1～0.3mg/l TDZ中的任一种或多种。

9.根据权利要求4～8任一项所述的班克木组织培养与快速繁殖方法，其特征在于，所述外植体的消毒包括：选用种子为外植体，在无菌条件下用75％酒精消毒30s，无菌水冲洗5～6次，再用质量比为0.1％的升汞溶液消毒4～10min。

10.根据权利要求4～8任一项所述的班克木组织培养与快速繁殖方法，其特征在于，所述移栽是在班克木生根培养基中培养30～40天后，炼苗3～4天移栽至珍珠岩、草炭基质中培养，移栽温度为18～25℃。