[发明专利]班克木培养基及组织培养与快速繁殖方法

说明书

技术领域

本发明涉及植物组织培养的培养基，具体地，涉及用于班克木的培养基，以及班克木的组织培养与快速繁殖方法。

背景技术

班克木是山龙眼科的灌木或小乔木，主要分布于澳大利亚东南及西南沿海地区，适于生长在沙土、沙壤土或者覆沙的沙岩上。它是一种新型木本花卉，其叶、花和球果都是做干花的极好材料。关于班克木的繁殖方法，目前主要为播种繁殖和扦插繁殖，但受季节和气候条件的限制，繁殖系数很低，在资源有限的条件下不能在生产中大量推广。而组织培养是快速繁殖优良植物品种的一条重要途径，尤其是繁殖某些稀有植物或有较大经济价值的植物，对于植物种质资源的保存，有很大的优势。

如果采用组织培养的方法繁殖班克木，由于该植物特殊的生长环境，对温度、光照和营养元素的需求均较高，温度过高或光照强度过低都会导致组织培养苗的生长不良。迄今尚未发现适用于班克木的培养基，更没有见到文献报道运用组织培养方法对班克木进行快速繁殖，尤其是其种苗的继代，腋芽的诱导和生根。

因此需要研究班克木的专用培养基，以及它的组织培养方法，提供一套完整的快速繁殖技术体系。

发明内容

本发明的目的是针对上述技术空白，提供用于班克木的培养基，能够完成班克木的组织培养，建立一套完整的快速繁殖技术体系。

为了实现本发明的目的，本发明所提供一种班克木专用培养基，可用来进行组织培养，它是一种改良WPM培养基，即在WPM基本培养基的基础上对各大元素进行调整，具体包含下列元素成分：NH₄NO₃，200～400mg/L；Ca(NO₃)₂₄H₂O，250～600mg/L；KCl，400～900mg/L；CaCl₂₂H₂O，90～200mg/L；MgSO₄，180～400mg/L。

优选地，所述改良WPM培养基包含下列元素成分：NH₄NO₃，400mg/L；Ca(NO₃)₂4H₂O，556mg/L；KCl，894.5mg/L；CaCl₂2H₂O，192mg/L；MgSO₄，370mg/L。

优选地，所述改良WPM培养基包含下列元素成分：NH₄NO₃，200mg/L；Ca(NO₃)₂4H₂O，278mg/L；KCl，447.25mg/L；CaCl₂2H₂O，96mg/L；MgSO₄，185mg/L。

所述改良WPM培养基具体可用作班克木接种后的继代培养。

本发明的还提供了一种用于班克木组织培养的腋芽诱导培养基，其元素成分包括：在所述改良WPM培养基的基础上添加生长调节剂。

其中，所述班克木腋芽诱导培养基中添加的生长调节剂选自：0.5～1.5mg/l IBA(乙哚丁酸)、0.5～1.5mg/l 6-BA(6-苄基腺嘌呤)、0.5～1.5mg/l NAA(萘乙酸)、0.05～0.15mg/l 2，4-D(2，4-二氯苯氧乙酸)和0.1～0.3mg/l TDZ(苯基噻二唑基脲)中的任一种或多种。

本发明还提供了一种用于班克木组织培养的生根培养基，其元素成分包括：在所述改良WPM培养基的基础上添加生长调节剂和活性炭(AC)。

其中，所述班克木生根培养基中添加的生长调节剂选自：0.5～1.5mg/l IAA(吲哚-3-乙酸)、0.5～1.5mg/l IBA(乙哚丁酸)、0.5～1.5mg/l KT(激动素)和0.5～1.5mg/l NAA(萘乙酸)中的任一种或多种。

本发明的另一目的是提供了一种班克木组织培养与快速繁殖方法，包括如下步骤：外植体的消毒和无菌苗的获得，腋芽诱导和继代培养，生根培养和试管苗移栽。在无菌苗的获得，腋芽诱导和继代培养及生根培养阶段中使用的培养基包括所述改良WPM培养基。

其中，班克木组织培养的光照条件为自然散射光2500～3000Lux加人工辅助光2000～2500Lux，光照时间为14h/d。该光照条件和光照时间应用于班克木组织培养的每一个培养阶段(除外植体的消毒不需要光照之外)。