[发明专利]检测碱木质素酶解过程中漆酶吸附特性的方法

权利要求书

1. 一种检测碱木质素酶解过程中漆酶吸附特性的方法，包括以下步骤：

向碱木质素溶液中，添加漆酶—胶体金探针和ABTS，所述漆酶—胶体金探针包括漆酶，所述漆酶表面结合有粒径为15 nm～20 nm、Zeta电位为-30.5 mV～-35.5 mV的胶体金颗粒，调节pH值为4.0～5.0，调节溶液中漆酶—胶体金探针的酶活性浓度不小于20 U/g，ABTS的添加量为5 mg/L～20 mg/L，在30℃～40℃温度条件下振荡培养4～6天后，离心并取上清液真空冷冻干燥后，电镜水平检测漆酶—胶体金探针吸附于碱木质素的位点及吸附量，完成对漆酶吸附特性的检测。

2. 根据权利要求1所述的检测碱木质素酶解过程中漆酶吸附特性的方法，其特征在于，所述离心的工艺参数为：转速为9000 r/min，温度为4℃条件下离心至少10 min。

3. 根据权利要求1所述的检测碱木质素酶解过程中漆酶吸附特性的方法，其特征在于，所述振荡培养时的摇床转速为150 r/min～200 r/min。

4. 根据权利要求1或2或3所述的检测碱木质素酶解过程中漆酶吸附特性的方法，其特征在于，所述漆酶—胶体金探针是通过以下步骤制备得到的：

制备胶体金溶液并将其pH 值调节为4.5～5，向胶体金溶液中加入质量浓度不小于0.9 mg/mL的漆酶溶液，在搅拌条件下加入质量浓度为5 mg/mL～10 mg/mL的PEG-20000溶液，所述胶体金溶液、漆酶溶液与PEG-20000溶液的体积比为5∶（1.1～1.15）∶（0.6～0.65），充分反应后，用1000 r/min～1200 r/min的转速进行第一次离心，去除聚集物，再以13000 r/min ～15000 r/min的转速进行第二次离心，吸弃上清液，将沉淀重溶于柠檬酸钠缓冲溶液，定容，制得所述漆酶—胶体金探针。

5. 根据权利要求4所述的检测碱木质素酶解过程中漆酶吸附特性的方法，其特征在于，所述柠檬酸钠缓冲溶液中含有浓度为0.2 mg/mL的PEG-20000。