[发明专利]食物过敏原检测试剂盒及其制备方法

权利要求书

1.一种食物过敏原检测试剂盒的制备方法，包括显色液A、显色液B，终止液，酶标抗IgE抗体，其特征在于：该试剂盒还包括包被了生物素化牛血清白蛋白-链霉亲和素的聚苯乙烯微孔板，多种分别生物素化过敏原，其中：

a.包被了生物素化牛血清白蛋白-链霉亲和素的聚苯乙烯微孔板，是在聚苯乙烯微孔板上，每孔加入稀释液Ⅰ稀释的浓度为3-5μg/ml的生物素化牛血清白蛋白包被缓冲液150μl，甩净后用稀释液Ⅰ洗板，甩净，拍干；每孔再加入稀释液Ⅱ稀释的浓度为3-5μg/ml的链霉亲和素包被缓冲液 150μl，温浴，甩净，用稀释液Ⅱ洗板，甩净，拍干；每孔加入封闭溶液体积250μl，温浴过夜，甩净，拍干备用；

b.多种生物素化过敏原，即将多种纯化的特异性抗体的过敏原分别用0.1mol/L，pH9.5的NaHCO₃缓冲液透析，过夜并于280nm处测吸光度值，计算抗体总量；另将多种活化的生物素分别溶于二甲基甲酰胺，按照生物素与过敏原的摩尔比为15-20:1的比例将二者混合反应1h，反应后的液体分别再用0.1mol/L 磷酸盐缓冲液4℃透析24小时，分装于试剂瓶中备用。

2.根据权利要求1所述食物过敏原检测试剂盒的制备方法，其特征在于：多种纯化的特异性抗体的过敏原分别是牛奶过敏原，鸡蛋过敏原，虾蟹过敏原，小麦过敏原，花生过敏原。

3.根据权利要求1所述食物过敏原检测试剂盒的制备方法，其特征在于：稀释液Ⅰ是按以下重量百分比的原料制备的：

三羟甲基氨基甲烷           0.606g/100ml

氯化钠                     0.877g/100ml

Proclin 300                  0.05ml/100m

双蒸水  950 ml 调pH=8.0 加0.5 ml Procilin 300  定溶至1000 ml。

4.根据权利要求1所述食物过敏原检测试剂盒的制备方法，其特征在于：稀释液Ⅱ是按以下重量百分比的原料制备的：

磷酸二氢钠         0.468g/100ml

磷酸氢二钠         0.716g/100ml

L-色氨酸            0.02g/100ml

氯化钠             0.877g/100ml

双蒸水       950 ml 调pH=8.0  定溶至1000 ml。

5.根据权利要求1所述食物过敏原检测试剂盒的制备方法，其特征在于：封闭溶液是按以下重量百分比的原料制备的：

磷酸二氢钠           0.029g/100ml

磷酸氢二钠           0.29g/100ml

6-氨基己酸           0.3g/100ml

氯化钠               0.876g/100ml

双蒸水               450 ml 调pH=7.3~ 7.5

牛血清白蛋白         0.4g/100ml

蔗糖                 3.5g/100ml

Procilin 300           0.05ml/100ml

加双蒸水定溶至500 ml 。

6.根据权利要求1所述食物过敏原检测试剂盒的制备方法，其特征在于：一种食物过敏原检测试剂盒，包括显色液A、显色液B，终止液，IgE抗体 ，其特征在于：该试剂盒还包括包被了生物素化牛血清白蛋白-链霉亲和素的聚苯乙烯微孔板，多种的生物素化过敏原。