[发明专利]一种内切型木聚糖酶的制备方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种内切型木聚糖酶的制备方法，内切型木聚糖酶以玉米芯为原料、经微生物发酵制得。 

技术背景

木聚糖酶是一种重要的半纤维素降解酶系，它能够降解由β-1，4-糖苷键连接β-D-吡喃型木糖单元构成主链，该酶系包括多种水解酶：β-木糖苷酶、α-L-呋喃型阿拉伯糖苷酶、α-葡萄糖醛酸酶和β-1，4-内切木聚糖酶，其中β-木糖苷酶作用于木寡糖的末端，释放出木糖残基；α-L-呋喃型阿拉伯糖苷酶和α-葡萄糖醛酸酶能够释放侧链糖；β-1，4-内切木聚糖酶(EC3.2.1.8)以内切方式作用于木聚糖主链，能够释放出不同链长的寡糖及少量的木糖，是木聚糖降解的关键酶。 

木聚糖酶特异性降解木聚糖，在许多领域具有重要的应用价值。木聚糖酶可以用来对粗纸浆进行预处理，可减少后续处理过程中对化学物质的使用。酶在造纸行业的应用尚处于研究和发展阶段，但是短短十几年中，有一些木聚糖酶已实现了工业应用。除了在纸浆、造纸行业的应用外，木聚糖酶可以作为食品添加剂用来改良面团性质，提升面包、馒头等面制品的品质，可以用来制备低聚木糖，也可用于饲料行业来改良青贮饲料和谷物饲料的营养特性。除此之外，木聚糖酶可用于咖啡、植物油和淀粉的提取、与果胶酶纤维素酶合用来澄清果汁、对植物纤维如亚麻、苎麻纤维的脱胶等等方面。 

虽然对木聚糖酶的研究越来越深入，但目前仅有少数木聚糖酶的生产实现了工业化。木聚糖酶存在的产量低和诱导成本高等问题，是限制其广泛应用的重要因素。木聚糖酶是一种诱导酶，很多微生物如细菌、霉菌和放线菌均能产生木聚糖酶。常见的木聚糖酶诱导物为木聚糖，对于一些微生物富含木聚糖的木质纤维原料也能起到诱导作用。但由于木聚糖存在于 植物细胞壁中且与纤维素、木质素之间形成致密的结构，目前可直接利用木质纤维质原料诱导产生高产量的木聚糖酶的微生物种类相对较少，大多数微生物只能利用纯净的木聚糖产生木聚糖酶，而提取木聚糖不仅工艺复杂而且得率较低，增加了制备木聚糖酶制剂成本。我国拥有丰富的廉价木质纤维原料，若直接利用廉价的农业废弃物产生木聚糖酶，将大大节省木聚糖酶的生产成本。在资源日益匮乏的今天，用农业废弃物代替木聚糖作为木聚糖酶的诱导底物是大势所趋。另外，由于木聚糖酶种类繁多，大多数能够降解木聚糖类的产酶菌株产生的木聚糖酶酶系组成复杂，因具有β-木糖苷酶使水解产物中木糖含量过高，而低聚木糖含量不足，从而影响了低聚木糖的品质。目前对木聚糖酶在馒头中的应用研究尚处于起步阶段，鲜有适用于馒头领域的微生物木聚糖酶的报道。 

农作物及其在加工过程中产生的副产物，如玉米芯、麸皮、甘蔗渣等农业废弃物，均为重要的木质纤维原料，主要化学成分是纤维素、半纤维素。由于缺乏合理的利用，大量的农作物秸秆及副产物等废弃物除非常少量的可以做为饲料用，绝大部分被焚烧，使有机质大量流失，空气污染。在资源日益匮乏的今天，若能直接以农业废弃物为原料制备低成本工业酶制剂，不仅可以充分利用农业废弃物，合理利用资源，而且可以获得巨大的经济效益，保护环境。我国的微生物资源十分丰富，结合实际应用的需求筛选可直接利用农业废弃物释放高产量木聚糖酶的生产菌株，并制备出低成本的木聚糖酶纯酶，具有重要的实际意义。 

本发明的目的正是针对上述问题而研制的一种高效率、低成本的直接以玉米芯为原料的木聚糖酶及其制剂的方法，该方法以一株新型木聚糖酶产生菌株——绿垂曲霉对该原料进行微生物发酵处理，制备产量高、成本低、特异性好的木聚糖酶，该酶可降解木聚糖产生聚合度为2至5的低聚木糖用于工业化生产低聚木糖，还可用于制浆造纸等行业。 

本发明使用廉价的农以废弃物玉米芯为原料制备木聚糖酶制剂，降低了木聚糖酶的成本，具有良好的应用前景。 

发明内容

本发明所解决的技术问题是，直接以农业废弃物玉米芯为原料经微生物发酵方法制备内切型木聚糖酶的方法。 

本发明的目的是通过以下方案来实现的： 

1.玉米芯经干燥、粉碎预处理 

2.液体发酵产木聚糖酶