[发明专利]一种南瓜籽抗氧化肽的制备方法

权利要求书

1.一种南瓜籽抗氧化肽的制备方法，其特征是包括以下步骤：

（1）南瓜籽分离蛋白溶液的制备：以脱脂南瓜籽粉为原料，利用碱溶酸沉法得到南瓜籽分离蛋白，然后加水配制成质量浓度为4~8%的南瓜籽分离蛋白溶液，搅拌均匀；

（2）酶解：将步骤（1）得到的南瓜籽分离蛋白溶液在沸水浴中加热5~15分钟使蛋白变性，冷却后调节pH到2.5~3.5，然后加蛋白酶5000~8000U/g，在45~55 ℃水浴中水解2~6h，水解过程中保持pH恒定；

（3）灭酶离心后的酶解液通过超滤富集活性肽，最后经浓缩和冷冻干燥，得到南瓜籽抗氧化肽。

2.根据权利要求1所述的一种南瓜籽抗氧化肽的制备方法，其特征是碱溶酸沉淀法提取南瓜籽蛋白的工艺条件是：温度为40~50℃，料液比为1∶30~40，pH值为10~11，浸提时间为1.5~2.5h。

3.根据权利要求1所述的一种南瓜籽抗氧化肽的制备方法，其特征是所述的蛋白酶是酸性蛋白酶或木瓜蛋白酶或风味蛋白酶或2709碱性蛋白酶或Alcalase2.4L碱性蛋白酶中的任意一种。

4.根据权利要求1所述的一种南瓜籽抗氧化肽的制备方法，其特征是所述超滤所用超滤膜的截留分子量为4KDa，超滤压力为0.15~0.25MPa、料液质量浓度为1~3%、料液pH为6~8，操作时间为50~70分钟。

5.根据权利要求1所述的一种南瓜籽抗氧化肽的制备方法，其特征是所述离心时转速为4500~5500r/min，离心时间为10~30分钟。

6.根据权利要求1至5所述的一种南瓜籽抗氧化肽的制备方法，其特征是包括以下步骤：

（1）南瓜籽分离蛋白溶液的制备：以脱脂南瓜籽粉为原料，利用碱溶酸沉法得到南瓜籽分离蛋白，然后加水配制成质量浓度为5%的南瓜籽分离蛋白溶液，搅拌均匀；

（2）酶解：将步骤（1）得到的南瓜籽分离蛋白溶液在沸水浴中加热10分钟使蛋白变性，冷却后调节pH到2.5，然后加酸性蛋白酶6000U/g，在50℃水浴中水解5h，水解过程中保持pH恒定；

（3）水解完成后迅速煮沸10分钟，使酶失活，冷却后在转速为5000r/min的条件下离心20分钟，然后将酶解液通过超滤富集活性肽，超滤膜的截留分子量为4KDa，超滤压力为0.2MPa、料液质量浓度为2%、料液pH为7，操作时间为60分钟，最后经浓缩和冷冻干燥，得到南瓜籽抗氧化肽。