[发明专利]一种植物蛋白抗氧化剂的制备方法

说明书

技术领域

本发明涉及植物蛋白的高值化利用，具体涉及一种植物蛋白酸性抗氧化肽的制备方法。

背景技术

自从Harman提出自由基理论以来，许多研究证据表明人体氧化产生的自由基参与许多病例过程如心血管疾病、老年白内障、癌症、某些炎症及多种神经元病。目前使用的抗氧化剂大多是化学合成物如丁基羟基茴香醚BHA、二丁基羟基甲基BHT，虽然抗氧化效果很好，但对人体肝、脾、肺有害，具有蓄积性致癌作用。在最近的十年里，人们把目光转向来自于动植物的天然的、安全的抗氧化剂。已有专利报道采用各种酶或微生物水解动植物原料蛋白的水解产物中存在多种抗氧化肽，它们的抗氧化活性与原料蛋白相比更强，而且具有高安全性的特点。这些研究使人们对多肽的生物活性有了新的认识，也为抗氧化剂的开发提供了一种新的途径，但使用上述方法得到的抗氧化产物纯度较低，不利于它的广泛使用。

有研究报道指出含酸性氨基酸的肽，其抗氧化活性较高，其活性与酸性氨基酸侧链羧基螯合金属离子有关。有科研工作者从猪肌原纤维蛋白酶解物中分离到含有大量酸性氨基酸的抗氧化肽，首次发现酸性肽具有抗氧化活性，它们不含酪氨酸和组氨酸，酸性氨基酸侧链羧基与金属离子互作钝化金属离子的氧化作用，减弱自由基链反应，达到抗氧化效果。

近年来，科研工作者通过抑制醛和羧酸的氧化的实验来评价各种杂环类化合物的抗氧化性。结果发现多种杂环类化合物具有较强的抗氧化活性。从烘烤咖啡豆中分离得到的杂环化合物，可以预防由于氧化破坏导致的疾病，如癌症、动脉硬化、免疫力下降和衰老。

发明内容

本发明的目的在于克服现有技术存在的上述不足，提供一种植物蛋白抗氧化剂的制备方法，具体技术方案如下。

一种植物蛋白抗氧化剂的制备方法，包括如下步骤：

（1）原料预处理：以植物蛋白为原料，加水使蛋白质量含量达到10%-15%，在100℃-121℃的温度下加热15min-30min，并过胶体磨得到植物蛋白浆液；

（2）控制酶解：在植物蛋白浆液中加入Alcalase或Papain中的一种或两种，以及氨基酸混合物，酶解至水解度为8%-12%，灭酶，离心，得酶解液,；

（3）离子交换树脂：将酶解液通过阳离子交换树脂，以pH值 5-7的水为洗脱剂，收集洗脱液；将阳离子交换树脂洗脱液通过阴离子交换树脂，以pH值2.5-4的水为洗脱剂，收集洗脱液,得酸性抗氧化肽水溶液；

 (4)将酸性抗氧化肽水溶液浓缩至固形物质量含量为25%-30%,添加占浓缩后酸性肽水溶液质量5%-8%的卵磷脂，过均质机混合均匀,100-121℃反应60-90min，得热反应产物；

（5）真空浓缩洗脱液，喷雾干燥，得强抗氧化剂。

上述的植物蛋白酸性抗氧化肽的制备方法，所述步骤（1）中所述植物蛋白为花生蛋白、大豆蛋白及小麦蛋白。

上述的植物蛋白酸性抗氧化肽的制备方法，步骤（2）中所述氨基酸混合物为食品级精氨酸和赖氨酸按质量比2：1～6：1的混合物，总添加量为植物蛋白质量的2‰-8‰。 

上述的植物蛋白酸性抗氧化肽的制备方法，步骤（3）中，所得酸性抗氧化肽有90%的肽分子量在1000-3000Da之间。

上述的植物蛋白酸性抗氧化肽的制备方法，步骤（4）中的卵磷脂为大豆卵磷脂或蛋黄卵磷脂。

上述的植物蛋白酸性抗氧化肽的制备方法，步骤（4）所述过均质机混合为在20～50MP下均质1～2次。

本发明与现有技术相比具有如下优点：

1、本发明制得的植物蛋白经过氨基酸反向调控酶解得到的酶解液具有较高的酸性氨基酸，且经过离子交换树脂的分离纯化得到的酸性肽，其抗氧化能力相当高，通过与卵磷脂热反应后能进一步增强肽的抗氧化活性，同时，热反应产物中含有较多具有强抗氧化性的的杂环化合物，所得最终产物具有较强的抗氧化活性。

2、本发明公开的抗氧化剂比市面上常用的抗氧化剂（BHT、植酸、生姜抽提物和异VC钠）的抗氧化性强2倍以上。

3、本发明公开的抗氧化剂的制备工艺简单，产品安全，可规模化生产。

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