[发明专利]脱细胞干燥活性羊膜的制备方法无效
| 申请号： | 201110171098.3 | 申请日： | 2011-06-23 |
| 公开（公告）号： | CN102225217A | 公开（公告）日： | 2011-10-26 |
| 发明（设计）人： | 晏飞燕 | 申请（专利权）人： | 天津世纪康泰生物医学工程有限公司 |
| 主分类号： | A61L27/36 | 分类号： | A61L27/36 |
| 代理公司： | 天津市北洋有限责任专利代理事务所 12201 | 代理人： | 陆艺 |
| 地址： | 300457 天津市*** | 国省代码： | 天津;12 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 细胞 干燥 活性 羊膜 制备 方法 | ||
1.一种脱细胞干燥活性羊膜的制备方法，其特征是由如下步骤组成：
(1)原料处理：取通过病原体检测后正常的足月剖腹产术后的人胎盘，用无菌生理盐水清洗，除去血液成分，将羊膜从胎盘绒毛膜上完整钝性分离，用细胞刮匙刮除羊膜基质面附着的基质成分；
(2)反复冻融：将步骤(1)处理后的羊膜于-60℃～-80℃冷冻2～6h，于37℃水浴融化10～40min，如此反复1～5次；
(3)清洗：将步骤(2)处理后的羊膜浸入PBS液中，于4℃摇床清洗18～30h，取出浸入去污剂中，于20～40℃，在摇床20～200转/分的速度下振荡18～30h；取出，再浸入PBS液中，于2～10℃，在摇床20～200转/分的速度下振荡40～56h；每8h换一次PBS液；
所述100ml去污剂溶液是用0.15ml～0.35ml的triton X-100，0.15g～0.35g的脱氧胆酸钠溶液，余量为PBS配制而成；
(4)冷冻干燥：将经步骤(3)清洗后的羊膜贴附于无菌的醋酸纤维素膜或聚偏氟乙烯膜上，切成统一尺寸的羊膜片，将羊膜片置于冷冻干燥机中，-40～-60℃冷冻干燥2～48h，除去水分，即获得脱细胞干燥活性羊膜；真空包装并封口；
(5)伽马射线消毒灭菌。
2.根据权利要求1所述的一种脱细胞干燥活性羊膜的制备方法，其特征是所述步骤(2)反复冻融为：将步骤(1)处理后的羊膜于-70℃冷冻4h，于37℃水浴融化20min，如此反复3次。
3.根据权利要求1所述的一种脱细胞干燥活性羊膜的制备方法，其特征是所述步骤(3)清洗为：将步骤(2)处理后的羊膜浸入PBS液中，于4℃摇床清洗24h，取出浸入去污剂中，于30℃，在摇床100转/分的速度下振荡24h；取出，再浸入PBS液中，于8℃，在摇床100转/分的速度下振荡48h；每8h换一次PBS液；
所述100ml去污剂溶液是用0.25ml的triton X-100，0.25g的脱氧胆酸钠溶液，余量为PBS配制而成。
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