[发明专利]一种中药注射剂致敏原的综合检测方法

权利要求书

1.一种中药注射剂致敏原的综合检测方法，其特征在于，包括：

(1)分离中药注射剂的成分，将各成分或各成分合成全抗原所产生的特异性抗体IgA、IgD、IgE、IgG、IgM按一定规律包埋抗原或抗体成底芯片点阵，与经中药注射剂致敏的人或动物中的特异性IgE结合，再与标记好的抗人或抗动物IgE抗体显色，根据显色强、弱、有、无，由底芯片成分判断中药注射剂对人或动物致敏成分及IgE；

(2)包埋抗IgE抗体制成底芯片，捕获拟用或使用过中药注射剂的人或动物血液中的IgE，再与由中药注射剂已知结构成分抗原的标记物盖芯片，或与由中药注射剂已知结构成分作抗原，注射到动物体内产生特异性抗体IgA、IgD、IgE、IgG、IgM，的标记物有规律排列构成的盖芯片反应，根据显色强、弱、有、无，由盖芯片成分判断中药注射剂对人或动物致敏成分及IgE；

(3)包埋抗IgE抗体，捕获拟用或使用过中药注射剂的人或动物血液中的IgE，再与中药注射剂液、含药血清反应，采用HPLC、HPLC/MS、GC/MS测定，比较反应前后相应指纹图谱的差异确定中药注射剂对人或动物致敏成分及IgE；

(4)综合上述分析，最终确定中药注射剂对人或动物产生致敏的成分及特异性的IgE。

2.一种中药注射剂致敏原的底芯片法检测方法，其特征在于，包括

步骤1：分离中药注射剂的各成分，直接或与蛋白质化学合成为全抗原；

步骤2：将中药注射剂的各个成分的全抗原按顺序固定于固体支持物制成芯片，向每个检测孔加入待测血清，同时设立空白对照，加入稀释液；孵育，洗去未结合物质；

步骤3：加入酶标记的抗IgE抗体，孵育，洗去未结合物质；

步骤4：显色，与空白对照对比分析吸光度，当检测孔的吸光度强度强于空白对照时，则检测孔中对应的抗原可能为中药注射剂的致敏原。

3.一种中药注射剂致敏原的底芯片检测方法，其特征在于，包括：

步骤1、中药注射剂的各成分的合成全抗原的特异性抗体IgE按顺序固定于固体支持物制成芯片，向每个检测孔加入中药注射剂成分的合成全抗原溶液；同时设立空白对照，只加稀释液；孵育，洗去未结合物质；

步骤2、在检测孔中加入待测血清，孵育，洗去未结合物质；

步骤3、在检测孔中加入酶标抗IgE抗体，孵育，洗去未结合物质；

步骤4、显色，与空白对照对比分析吸光度，当检测孔的吸光度强于空白对照时，则检测孔中特异性抗体对应的抗原为致敏原。

4.一种中药注射剂致敏原的底芯片法检测方法，其特征在于，包括：

步骤1、中药注射剂使用致敏者的特异性IgE抗体按顺序固定于固体支持物制成芯片，向每个检测孔加入酶标记的对应合成抗原；同时设立空白对照，只加稀释液；孵育，洗去未结合物质；

步骤2、显色，与空白对照对比分析吸光度，当检测孔的吸光度强于空白对照时，则检测孔中特异性抗体对应的抗原可能为致敏原。

5.一种中药注射剂致敏原的底芯片法检测方法，其特征在于，包括：

步骤1、中药注射剂使用致敏者的特异性抗体IgE按顺序固定于固体支持物制成芯片，向每个检测孔加入中药注射剂成分的合成抗原溶液；同时设立空白对照，只加稀释液；孵育，洗去未结合物质；

步骤2、在检测孔中加入酶标抗体，孵育，洗去未结合物质；

步骤3、显色，与空白对照对比分析吸光度，当检测孔吸光度强于空白对照为阳性，根据强弱程度确定致敏强度，根据所对应的IgE抗体可确定原注射剂中的致敏成分。

6.一种中药注射剂致敏原的免疫指纹图谱法检测方法，其特征在于，包括：

步骤1、将抗IgE抗体固定于固体支持物制成芯片，加待测血清液至检测孔中，孵育，洗去未结合物质；

步骤2、加中药注射剂或含药血清孵育，洗去未结合物质；

步骤3、收集未结合物质，采用GC/MS或HPLC/MS对未结合物质和中药注射剂进行指纹图谱分析，根据指纹图谱特征峰差异确定中药注射剂中的致敏成分。