[发明专利]蝴蝶文心兰优质种苗快速繁殖方法

说明书

技术领域

本发明涉及蝴蝶文心兰的繁殖方法。具体地说，涉及蝴蝶文心兰种苗的组织培养试管繁殖方法。

背景技术

蝴蝶文心兰，拟蝶唇兰属(Psychopsis)植物及其杂交种的总称，原产于中南美洲，分布于特尼特岛、哥伦比亚、哥斯达尼加、秘鲁、巴拿马等地，多作为珍稀兰花盆栽观赏。本属植物共有5个原生种并育成了50多个杂交种。蝴蝶文心兰是兰科植物中造型独特、极富观赏价值的一类兰花，它的花序为无限花序，常年开花，在开花期内，随花序轴的生长不断离心地产生花芽，即在一朵花凋谢后，另一朵花接着开放。蝴蝶文心兰的花形酷似一只鲜艳蝴蝶，细长的花瓣就像蝴蝶长长的触须，侧萼片就像黄褐斑纹的翅膀，每朵花花期约2～3周。

蝴蝶文心兰为我国近年来引进的珍稀兰花，种苗昂贵。它的常规繁殖常采用分株繁殖，但分株繁殖系数极低，远远不能满足市场的需要。采用无菌播种和组织培养能进行蝴蝶文心兰规模化快速繁殖，但采用无菌播种难以保持一些优良株系特别是一些优良杂种株系的优良性状，以蝴蝶文心兰的花茎为外植体，采用组织培养培养技术能有效地解决这些问题。

目前，国内外尚无蝴蝶文心兰组织培养种苗繁殖的报道。也没有蝴蝶文心兰种苗组织培养专利的申请。

发明内容

本发明提供了一种繁殖速度快，可在短期内获得大量试管苗，不会对母株产生损伤，能保持母株优良性状的蝴蝶文心兰的组织培养繁殖方法。

本发明主要应用植物组织细胞的全能性和植物组织培养技术，以蝴蝶文心兰的花梗节段为外植体，利用独特的培养基诱导出花梗苗，再以花梗苗的茎尖进行原球茎的诱导和分化、然后进行壮苗培养，生产出优质的蝴蝶文心兰种苗，从而实现了本发明的目的。

本发明的蝴蝶文心兰种苗繁殖方法，其特征包括以下的步骤：

(1)开花时选取生长健壮的蝴蝶文心兰的带节花梗为外植体；

(2)将外植体依次用酒精浸泡，升汞溶液消毒，无菌水漂洗后接种到花梗苗诱导培养基上培养，30～40天时能诱导花梗苗的产生。所述的花梗苗诱导培养基每升含花宝1号(HYPONeX 1)1～2g，肌醇80～120mg，甘氨酸1.5～2.5mg，盐酸硫胺素(VB1)0.05～0.2mg，盐酸吡哆醇(VB6)0.4～0.8mg，烟酸0.4～0.8mg，柠檬酸钠50～200mg，萘乙酸(NAA)0.2～1mg，10～20％的椰子汁，蔗糖15～30g，琼脂6～7g。

(3)将由花梗诱导的小苗转移到类原球茎诱导培养基培养，40～60天能诱导类原球茎的形成，在相同的培养基上能进行类原球茎的增殖，增殖倍数3～5倍，增殖周期30～40天。所述的类原球茎诱导和增殖培养基为每升含花宝2号1～2g，肌醇80～120mg，甘氨酸1.5～2.5mg，盐酸硫胺素(VB1)0.05～0.2mg，盐酸吡哆醇(VB6)0.4～0.8mg，烟酸0.4～0.8mg，柠檬酸钠50～200mg，6-苄基腺嘌呤(6-BA)2～5mg，萘乙酸(NAA)0.2～1mg，10％～20％的椰子汁，蔗糖15～30g，琼脂6～7g。

(4)将增殖而来的类原球茎接种到分化培养基培养，40～50天能分化出小苗。所述的原球茎分化培养基为每升含花宝1号1～2g，肌醇80～120mg，甘氨酸1.5～2.5mg，盐酸硫胺素(VB1)0.05～0.2mg，盐酸吡哆醇(VB6)0.4～0.8mg，烟酸0.4～0.8mg，萘乙酸(NAA)0.5～1.5mg，活性炭0.5～1g，蔗糖15～30g，琼脂6～7g。

(5)将类原球茎分化出的小植株接种到壮苗培养培养，40～50天能试管苗的形成，所述的壮苗培养基为每升含花宝1号1～2g，花宝2号1～2g，肌醇80～120mg，甘氨酸1.5～2.5mg，盐酸硫胺素(VB1)0.05～0.2mg，盐酸吡哆醇(VB6)0.4～0.8mg，烟酸0.4～0.8mg，萘乙酸(NAA)1～2mg，蔗糖20～30g，香蕉汁50～100g，活性碳0.5～1g，琼脂6～7g。

(6)将试管苗在温室的自然光下炼苗，然后洗净根部的培养基，在用树皮、兰石和泥炭的混合基质(体积比2∶2∶1)中栽培，得到种苗。

上述步骤(2)～(5)中培养基pH 5.4～5.6，培养温度24～28℃，光照的照度为1500～2000lx，光照时间为12～16小时/天。

2.根据权利要求1所述的一种蝴蝶文心兰种苗繁殖方法，步骤(2)所述的酒精浓度是体积分数70％～80％，浸泡时间是30～60秒，所述的升汞溶液的浓度是质量分数0.1％～0.2％，消毒时间是10～20分钟，所述的无菌水的漂洗次数是4～6次。