[发明专利]复合微生物酶制剂及其制备方法

权利要求书

1.生产复合微生物酶制剂的方法，其特征在于包括如下步骤：

a、己酸菌液的制备：己酸菌菌种经过复壮、扩大培养，得到己酸菌液；

b、窖泥富集菌液的制备：取窖泥中的菌种进行培养，得到窖泥富集菌液；

c、窖泥功能菌的制备：己酸菌液与窖泥富集菌液混合，接种于窖泥功能菌培养基中，32～36℃下培养22～27d，得到窖泥功能菌液，干燥，得到干制窖泥功能菌；

其中，己酸菌液与窖泥富集菌液中的菌种干重重量之比为1∶1～5；所述窖泥功能菌培养基为：窖皮泥100～150重量份，糟醅700～800重量份，中温大曲100～200重量份，乙醇7.2～13.8重量份，硫酸铵0.27～0.69重量份，培养基含水量为30～60wt％，pH4～7；

d、干制窖泥功能菌以菌干重计、生香酵母、B类酶促物质、红曲酯化酶按重量配比1∶0.25～0.35∶1～2∶0.30～0.45混合，得到复合微生物酶制剂；

其中，所述的红曲酯化酶由产酯红曲霉经发酵培养而制得；

所述的B类酶促物质采用下述方法制备而成：以浓香型白酒生产的丢糟为基质，加入对丢糟质量5～15％的高温大曲，和丢糟质量5～15％的黄水过滤后所得的滤渣，发酵5～15天，然后干燥、粉碎，制得水分≤15wt％的粗酶制剂。

2.根据权利要求1所述的生产复合微生物酶制剂的方法，其特征在于：a步骤中的己酸菌菌种采用下述方法进行复壮、扩大培养：

将己酸菌菌种接入无菌水中，于经过75～85℃保温8～10min，然后接种于己酸菌种子培养基中32～36℃下培养7～8d，再于己酸菌扩大培养基中30～35℃下扩大培养5～7d；

其中，己酸菌种子培养基为：以蒸馏水1000mL计，乙酸钠0.5％，酵母膏0.1％，磷酸氢二钾0.04％，硫酸铵0.05％，硫酸镁0.02％，碳酸钙1％，乙醇2％，121℃灭菌20min，pH6.5～7；

己酸菌扩大培养基为：以蒸馏水1000mL计，硫酸铵0.04％，糟醅浸提液40％，乙酸钠0.7％，碳酸钙0.8％，乙醇0.5％，121℃灭菌20min，pH6-6.5。

3.根据权利要求1或2所述的生产复合微生物酶制剂的方法，其特征在于：b步骤中窖泥富集菌液采用下述方法制备得到：

以窖泥1g计，用无菌水稀释约100倍，于75～85℃回流热处理25～35min后，取10mL窖泥菌液接种入1000mL窖泥富集液培养基中，32～37℃恒温培养3～5d，培养结束后选择发酵旺盛的菌种作为原始菌种再进行扩大培养；

所述窖泥富集液培养基为：以蒸馏水1000mL计，葡萄糖3％，蛋白胨2％，牛肉膏1.5％，磷酸氢二钾0.05％，碳酸钙2％，乙酸钠0.5％，121℃灭菌20min，pH6～6.5。

4.根据权利要求1～3任一项所述的生产复合微生物酶制剂的方法，其特征在于：c步骤中的pH值采用黄水进行调节。

5.根据权利要求1～4任一项所述的生产复合微生物酶制剂的方法，其特征在于：c步骤中，接种时，己酸菌液与窖泥富集菌液中的菌种总量为培养基质量的2～6％，己酸菌液与窖泥富集菌液中的菌种干重重量之比为1∶3～4；所述窖泥功能菌培养基为：窖皮泥120～130重量份，糟醅730～750重量份，中温大曲140～160重量份，乙醇9.9～11.44重量份，硫酸铵0.396～0.52重量份，培养基含水量为40～50wt％，pH5～6。

6.根据权利要求1～5任一项所述的生产复合微生物酶制剂的方法，其特征在于：c步骤所得窖泥功能菌液于40～60℃下干燥至含水量为5～25wt％，得到干制窖泥功能菌。

7.根据权利要求6所述的生产复合微生物酶制剂的方法，其特征在于：c步骤所得窖泥功能菌液于45～50℃下干燥至含水量为10～15wt％。

8.根据权利要求1～7任一项所述的生产复合微生物酶制剂的方法，其特征在于：d步骤中所述的干制窖泥功能菌以菌干重计、生香酵母、B类酶促物质、红曲酯化酶的重量配比为1∶0.25～0.30∶1.5～1.7∶0.35～0.40。

9.由权利要求1～8任一项的方法生产的复合微生物酶制剂。