[发明专利]对虾传染性肌肉坏死病毒一步法RT-PCR检测试剂盒及检测方法无效
申请号: | 201110173709.8 | 申请日: | 2011-06-18 |
公开(公告)号: | CN102251057A | 公开(公告)日: | 2011-11-23 |
发明(设计)人: | 闫冬春;刘鸿玲;谢玮 | 申请(专利权)人: | 鲁东大学 |
主分类号: | C12Q1/70 | 分类号: | C12Q1/70;C12Q1/68;C12R1/93 |
代理公司: | 暂无信息 | 代理人: | 暂无信息 |
地址: | 264000 山东省烟台市芝*** | 国省代码: | 山东;37 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 对虾 传染性 肌肉 坏死 病毒 一步法 rt pcr 检测 试剂盒 方法 | ||
1.对虾传染性肌肉坏死病毒一步法RT-PCR检测试剂盒,特征在于包括:
(1)、RT-PCR buffer管,内装2×RT-PCR buffer;
(2)、引物管,内装传染性肌肉坏死病毒正反引物;
(3)、酶管,内装反转录酶及DNA聚合酶;
(4)、去离子水管,内装无菌去离子水;
(5)、阴性对照管,内装SPF对虾核酸;
(6)、阳性对照管,内装传染性肌肉坏死病毒cDNA阳性克隆。
2.按照权利要求1所述对虾传染性肌肉坏死病毒一步法RT-PCR检测试剂盒,其特征在于所述RT-PCR引物对包括
正向引物序列5’-CCAACATACGGTACAGTGGCAG-3’
反向引物序列5’-ATCGGTTGCCCAGGATACAAG-3’
产物长度为123bp。
3.权利要求1所述检测试剂盒用于检测对虾传染性肌肉坏死病毒。
4.利用上述权利要求1或2所述试剂盒实现的一种对虾传染性肌肉坏死病毒一步法RT-PCR检测方法,其特征在于
RT-PCR反应体系:
RT-PCR反应程序:
cDNA合成和预变性:45℃30min,94℃2min,1个循环;PCR扩增:94℃变性15s,55℃退火30s,72℃cDNA合成1min,40个循环;
终延伸:72℃延伸5min,1个循环;
4℃保存。
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