[发明专利]一种浮游动物及其肠道内含物总基因组DNA的提取方法有效
| 申请号： | 201110175350.8 | 申请日： | 2011-06-27 |
| 公开（公告）号： | CN102250882A | 公开（公告）日： | 2011-11-23 |
| 发明（设计）人： | 郭志灵;刘胜;林森杰;李涛;胡思敏 | 申请（专利权）人： | 中国科学院南海海洋研究所 |
| 主分类号： | C12N15/10 | 分类号： | C12N15/10 |
| 代理公司： | 广州科粤专利商标代理有限公司 44001 | 代理人： | 刘明星;余炳和 |
| 地址： | 510301 *** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 浮游动物 及其 肠道 内含 基因组 dna 提取 方法 | ||
1.一种浮游动物及其肠道内含物总基因组DNA的提取方法，其特征在于，包括以下步骤：
(a)将浮游动物用中性鲁格氏液固定，再将同一种类的固定好的浮游动物分在一起，然后将固定好的同一种类的浮游动物用无菌、且经过0.2μm滤膜过滤的海水反复冲洗浮游动物的体表，直至体表无其他生物附着；取出浮游动物，再用无菌超纯水清洗，取出将水吸干，冰冻成块，再研磨破碎；
(b)将研磨破碎的浮游动物用DNA裂解液裂解，55℃裂解2～48h，然后用常规方法提取裂解后溶液中的DNA，所得到的DNA即为浮游动物及其肠道内含物总基因组DNA；
所述的DNA裂解液为Tris-HCl 10～50mM，SDS 5～10g/L，EDTA 100mM，蛋白酶K200～500μg/mL，其余为水，pH8.0。
2.根据权利要求1所述的浮游动物及其肠道内含物总基因组DNA的提取方法，其特征在于，所述的步骤(a)中将浮游动物冰冻成块，是用液氮或低温将其冰冻成块。
3.根据权利要求2所述的浮游动物及其肠道内含物总基因组DNA的提取方法，其特征在于，所述的用低温将浮游动物冰冻成块是用-80℃的超低温冰冻。
4.根据权利要求1所述的浮游动物及其肠道内含物总基因组DNA的提取方法，其特征在于，所述的步骤(b)将研磨破碎的浮游动物用DNA裂解液裂解，是在55℃裂解48h，所述的DNA裂解液为Tris-HCl 10mM，SDS 5g/L，EDTA 100mM，蛋白酶K 200μg/mL，其余为水，pH8.0。
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