[发明专利]干扰Bx-cpl-2基因表达的dsRNA载体及其在松材线虫防治和研究中的应用无效
申请号: | 201110175384.7 | 申请日: | 2011-06-27 |
公开(公告)号: | CN102250942A | 公开(公告)日: | 2011-11-23 |
发明(设计)人: | 陈国华;王殿东;白婷;成新跃;梅眉;谢丙炎 | 申请(专利权)人: | 中国农业科学院蔬菜花卉研究所 |
主分类号: | C12N15/80 | 分类号: | C12N15/80;C12N1/15;A01N63/04;A01P5/00;C12Q1/68;C12R1/645 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 干扰 bx cpl 基因 表达 dsrna 载体 及其 松材线虫 防治 研究 中的 应用 | ||
1.干扰松材线虫Bx-cpl-2基因表达的dsRNA干扰载体,其特征在于,在骨架载体的多克隆位点上按顺序正向插入有Bx-cpl-2基因的完整或部分正义链和与所述正义链互补的反义链。
2.根据权利要求1所述的dsRNA干扰载体,所述骨架载体为农杆菌介导的表达载体。
3.根据权利要求2所述的dsRNA干扰载体,所述正义链的核苷酸序列如Seq ID No.2所示,所述正义链的核苷酸序列如所示Seq ID No.3所示,所述农杆菌介导的载体为PHDT-RH,所述正义链插入在PHDT-RH的LB和RB之间的5’端多克隆位点,所述反义链插入在PHDT-RH的LB和RB之间的3’端多克隆位点,得到的dsRNA干扰载体为PHD-RH-CPL1。
4.转入有权利要求1~3任一所述dsRNA干扰载体的菌株。
5.根据权利要求4所述的菌株,指转入有PHD-RH-CPL1的灰葡萄孢菌(Botrytis cinerea)。
6.权利要求1~3任一所述dsRNA干扰载体在松材线虫防治中的应用。
7.一种研究Bx-cpl-2基因功能的新方法,其特征在于,将权利要求1~3任一所述dsRNA干扰载体转化到丝状真菌中,然后通过丝状真菌转化子的菌丝体饲喂松材线虫,观察松材线虫的表型。
8.根据权利要求7所述的新方法,所述丝状真菌指灰葡萄孢菌。
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