[发明专利]白癜风黑素细胞移植涂布载体系统的制备方法及其应用有效
| 申请号： | 201110175730.1 | 申请日： | 2011-06-28 |
| 公开（公告）号： | CN102266586A | 公开（公告）日： | 2011-12-07 |
| 发明（设计）人： | 鲁严;吴迪;朱文元;李雪;周梅华 | 申请（专利权）人： | 江苏省人民医院 |
| 主分类号： | A61L27/38 | 分类号： | A61L27/38;C12N5/071 |
| 代理公司： | 暂无信息 | 代理人： | 暂无信息 |
| 地址： | 210029 江*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 白癜风 细胞 移植 载体 系统 制备 方法 及其 应用 | ||
1.一种白癜风黑素细胞移植涂布载体系统的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
(1)配置黑素细胞培养基：取黑素细胞基本培养液Hams F1280～120份，加入胎牛血清FBS 8～12份，人粒细胞集落刺激因子G-CSF 0.16～0.24份，100ng/ml的促黑素生成素α-MSH 0.08～0.12份，异甲基黄嘌呤IBMX0.08～0.12份，1.5ug/ml的肾上腺素及维生素C混合液0.8～1.2份，青链双抗霉素0.8～1.2份，在4℃的冰箱中保存；
(2)黑素细胞的体外培养：①无菌条件下获得自体皮肤样本，清洗后用0.25％的胰蛋白酶-EDTA消化液在37℃条件下消化10min～15min；②终止消化，获取细胞悬液，离心，弃上清，收集沉淀黑素细胞，加入上述黑素细胞培养基，置于细胞培养箱以37℃、5％CO2、饱和湿度条件下孵育；每2～3天更换1次上述黑素细胞培养基；③根据黑素细胞生长和增殖情况，进行传代5～6代即可完成体外培养，制成黑素细胞悬液；
(3)涂布载体系统的合成：以卡波姆940凝胶为涂布载体，卡波姆940凝胶常规高压灭菌处理，按1∶4～6的体积比加至黑素细胞悬液，并均匀混合至嗜喱状。
2.按照权利要求1所述的白癜风黑素细胞移植涂布载体系统的制备方法，其特征在于：所述黑素细胞培养基的优选组份为：黑素细胞基本培养液HamsF12 100份，胎牛血清FBS 10份，人粒细胞集落刺激因子G-CSF 0.20份，100ng/ml的促黑素生成素α-MSH 0.10份，异甲基黄嘌呤IBMX 0.10份，1.5ug/ml的肾上腺素及维生素C混合液1.0份，青链双抗霉素1.0份。
3.一种权利要求1所述的白癜风黑素细胞移植涂布载体系统的应用，其特征在于：在无菌条件下磨削皮肤白斑至点状出血，均匀涂抹上述白癜风黑素细胞移植涂布载体系统，以油纱布覆盖，常规包扎。
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