[发明专利]一种裂殖壶菌诱变方法及其产生的变异株

权利要求书

1.裂殖壶菌变异株321-3，其于2011年1月21日保藏于中国典型培养物保藏中心，菌种保藏号：CCTCC M 2011024，优选地，上述裂殖壶菌变异株具有DHA含量提高和/或生长速度快的特性，更优选地，所述变异株在蛋白质含量、蛋白质的氨基酸组成和/或脂肪酸组成有差异。

2.产生裂殖壶菌变异株的方法，所述裂殖壶菌变异株具有DHA含量提高和/或生长速度快的特性，所述方法包括将起始裂殖壶菌暴露于紫外线以进行诱变，以及将所述经紫外线诱变的菌株与脂肪合成关键酶(乙酰辅酶A羧化酶)抑制剂(例如喹禾灵)接触，从中筛选出DHA含量提高和/或生长速度快的变异株，更优选地，所述变异株在蛋白质含量、蛋白质的氨基酸组成和/或脂肪酸组成有差异。

3.如权利要求2所述的方法，其中所述紫外线的辐照时间为30秒-100秒，优选为70秒-90秒。

4.如权利要求2或3所述的方法，所述喹禾灵为{(R)-2-[4-(6-氯-2-喹噁啉氧基)-苯氧基]-丙烯酸酯}，其浓度为10μmol/L-90μmol/L，优选为50μmol/L-80μmol/L。

5.培养裂殖壶菌变异株以生产DHA的方法，包括

将权利要求1所述的裂殖壶菌变异株，优选为裂殖壶菌变异株321-3，在适合培养裂殖壶菌以产生DHA的培养条件进行培养，优选地，所述培养条件包括：(a).含有50-70g/L的碳源和10-20g/L氮源的培养基；(b).培养温度：22-27℃；(c).初始pH：5.0-7.0。

6.权利要求5所述的方法其中所述的培养基包含(g/L)：

葡萄糖      50-70，

酵母浸膏    20-30，

谷氨酸钠    10-20；优选地还包含：

氯化钠      2.4-4.0，

硫酸镁      3.0-6.0，

硫酸铵      3.0-6.0。

7.由权利要求5或6所述方法产生的生物量。

8.包含权利要求7所述生物量或其中提取的DHA的食品，优选地，食品包括用于给食婴儿、儿童、青少年和成人的产品，更优选地所述食品是乳制品。

9.如权利要求1所述的裂殖壶菌变异株或权利要求2-4任一项所述的方法，其中所述裂殖壶菌变异株与常规的或起始的裂殖壶菌比较，所述裂殖壶菌变异株产生DHA的量，至少高于常规菌株或起始菌株约10，20，25，30，35，40％，优选至少高于常规菌株或起始菌株约41，42，43，44，45，46，47，48，49，50，51，52，53，54，55，56，57，58，59，60，61，62，63，64，65，66，67，68，69，70％，优选在7天的培养期内。

10.如权利要求1或9所述的裂殖壶菌变异株或权利要求2-4和9任一项所述的方法，所筛选的裂殖壶菌变异株具有高于常规或起始菌种至少约3，4，5，6，7，8，9，10％的生长速度，优选在7天的培养期内。