[发明专利]鸭瘟病毒 gG截段重组蛋白及其制备方法有效
| 申请号： | 201110177128.1 | 申请日： | 2011-06-28 |
| 公开（公告）号： | CN102250224A | 公开（公告）日： | 2011-11-23 |
| 发明（设计）人： | 程安春;杨晓圆;汪铭书;陈孝跃 | 申请（专利权）人： | 四川农业大学实验动物工程技术中心 |
| 主分类号： | C07K14/03 | 分类号： | C07K14/03;C07K1/22;C12N15/38;C12N15/70 |
| 代理公司： | 北京同恒源知识产权代理有限公司 11275 | 代理人： | 赵荣之 |
| 地址： | 625014 四*** | 国省代码： | 四川;51 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 瘟病 gg 重组 蛋白 及其 制备 方法 | ||
1.鸭瘟病毒 gG截段重组蛋白，其特征在于：其氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示。
2.根据权利要求1所述的鸭瘟病毒 gG截段重组蛋白，其特征在于：其DNA序列如SEQ ID NO:2 所示。
3.权利要求1所述的鸭瘟病毒 gG截段重组蛋白的制备方法，其特征在于：
A、以DPV基因组DNA为模板，采用核苷酸序列分别如SEQ ID No.3和SEQ ID No.4所示的上、下游引物PCR扩增得鸭瘟病毒 gG截段基因片段，与pMD18-T 的连接，得pMD18-gGM;
B、限制性内切酶BamHⅠ和XhoⅠ分别双酶切pMD18-gGM质粒和原核表达载体pET32a(+),并连接, 得重组原核表达质粒pET32a-gGM;
C、并将上述提取的重组质粒pET32a-gGM转化到表达宿主菌诱导表达,得鸭瘟病毒 gG截段重组蛋白粗品。
4.根据权利要求3所述的鸭瘟病毒 gG截段重组蛋白的制备方法，其特征在于：将步骤C所得鸭瘟病毒 gG截段重组蛋白粗品经镍琼脂糖凝胶亲和层析纯化后，得鸭瘟病毒 gG截段重组蛋白。
5.根据权利要求3所述的鸭瘟病毒 gG截段重组蛋白的制备方法，其特征在于：步骤C中的宿主菌为菌株BL21(DE3)，在IPTG浓度≥0.2mmol/L,诱导温度为30℃条件下进行诱导表达2小时，得鸭瘟病毒 gG截段重组蛋白。
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