[发明专利]一种PEG化重组猪-人尿酸氧化酶融合蛋白的制备及应用方法有效

专利信息
申请号: 201110181447.X 申请日: 2011-06-30
公开(公告)号: CN102260653A 公开(公告)日: 2011-11-30
发明(设计)人: 荣俊;匡红艳;孙中杰 申请(专利权)人: 北京盛宏生物技术有限公司
主分类号: C12N9/06 分类号: C12N9/06;C12N11/08;C12N15/53;C12N15/63;C12N1/21;A61K38/44;A61K47/48;A61P19/06;C12R1/19
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地址: 100031 北京市西*** 国省代码: 北京;11
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摘要:
搜索关键词: 一种 peg 重组 尿酸 氧化酶 融合 蛋白 制备 应用 方法
【权利要求书】:

1.一种重组猪-人尿酸氧化酶融合蛋白,其特征在于该融合蛋白的N端第1-222个氨基酸残基由猪尿酸氧化酶基因序列编码,第223-305个氨基酸序列由人尿酸氧化酶基因编码。将该融合蛋白与聚乙二醇(PEG)共价连接形成结合物,即:PEG化重组猪-人尿酸氧化酶。

2.权利要求1所述的结合物,其特征在于重组猪-人尿酸氧化酶与单甲氧基聚乙二醇甲酸琥珀酰亚胺酯反应,mPEG上活化的PEG与重组猪-人尿酸氧化酶融合蛋白分子中的部分游离氨基通过共价键连接,形成PEG化重组猪-人尿酸氧化酶。

3.权利要求2所述的结合物,其特征在于每个重组猪-人尿酸氧化酶亚基上共价连接8-12个PEG链,PEG的平均分子量为2-50KD,PEG为线形或分枝形。

4.权利要求3所述的结合物,其特征在于每个重组猪-人尿酸氧化酶亚基上共价连接9-11个PEG链,PEG的平均分子量为5-20KD,PEG为线形或分枝形。

5.权利要求4所述的结合物,其特征在于每个重组猪-人尿酸氧化酶亚基上共价连接9-10个PEG链,PEG的平均分子量为10KD,PEG为线形或分枝形。

6.权利要求2所述的结合物,其特征在于重组猪-人尿酸氧化酶为四聚体,核苷酸序列见序列表1,氨基酸序列见序列表2。

7.一种核酸分子,编码权利要求1所述的重组猪-人尿酸氧化酶。

8.质粒载体,含有权利要求7所述的核苷酸序列。

9.宿主细胞,含有权利要求8所述的质粒载体,为大肠杆菌BL21,保藏于中国典型培养物保藏中心,保藏编号为CCTCC M2011161。

10.一种降低人和动物血液尿酸含量的组合物,其特征在于包括权利要求1所述的PEG化重组猪-人尿酸氧化酶和药学上可接受的载体。

11.权利要求10所述的组合物,其特征在于该组合物以注射液或冻干粉针制剂形式存在。

12.权利要求1-11所述的结合物在制备用于降低人和动物血液尿酸含量的药物中的应用。

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