[发明专利]可回复性永生化大鼠骨髓间充质干细胞及其制备方法和应用无效
申请号: | 201110183749.0 | 申请日: | 2011-07-01 |
公开(公告)号: | CN102250841A | 公开(公告)日: | 2011-11-23 |
发明(设计)人: | 李廷玉;毕杨;龚敏;陈洁;江伟;张赟;魏小平 | 申请(专利权)人: | 重庆医科大学附属儿童医院 |
主分类号: | C12N5/10 | 分类号: | C12N5/10;C12N15/867;A61L27/38 |
代理公司: | 北京同恒源知识产权代理有限公司 11275 | 代理人: | 赵荣之 |
地址: | 400014 *** | 国省代码: | 重庆;85 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 回复 永生 大鼠 骨髓 间充质 干细胞 及其 制备 方法 应用 | ||
1.可回复性永生化大鼠骨髓间充质干细胞,其特征在于,携带有SV40T基因及潮霉素抗性基因,所述SV40T基因的两端还有同向的Loxp位点。
2.权利要求1所述的可回复性永生化大鼠骨髓间充质干细胞的制备方法,其特征在于,包括以下步骤:
a.将逆转录病毒表达质粒SSR69与包装质粒pAmhpo共转染HEK293细胞,获得重组逆转录病毒;
b.将步骤a所得重组逆转录病毒感染大鼠骨髓间充质干细胞,用潮霉素进行筛选,即得具有潮霉素抗性的可回复性永生化大鼠骨髓间充质干细胞。
3.根据权利要求2所述的可回复性永生化大鼠骨髓间充质干细胞的制备方法,其特征在于,所述步骤b是将步骤a所得重组逆转录病毒感染第3代大鼠骨髓间充质干细胞,感染后第3天用浓度为4μg/ml的潮霉素筛选2周,即得具有潮霉素抗性的可回复性永生化大鼠骨髓间充质干细胞。
4.权利要求1所述的可回复性永生化大鼠骨髓间充质干细胞作为成神经诱导分化的种子细胞的应用。
5.权利要求1所述的可回复性永生化大鼠骨髓间充质干细胞作为治疗新生大鼠缺氧缺血性脑损伤的种子细胞的应用。
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