[发明专利]一种用于筛检食品中乐果残留的微生物方法

权利要求书

1.一株青春双歧杆菌LJM-001的应用，其特征在于所述菌株的应用为一株青春双歧杆菌(Bifidobacterium adolescentis)LJM-001 CGMCC No.4090应用于食品乐果残留的筛检。

2.根据权利要求1所述的一株青春双歧杆菌LJM-001应用，其特征在于：所述的一株青春双歧杆菌LJM-001应用于食品乐果残留的筛检，包括步骤：

(1)筛检培养基制备：蛋白胨10g，牛肉膏10g，酵母膏5g，葡萄糖20g，乙酸钠5g，K₂HPO₄ 2g，MgSO₄·7 H₂O 0.5g，MnSO₄·4H₂O 0.2g，低聚果糖3g，柠檬酸二铵2g，吐温-80 1ml，琼脂15g，显色剂0.1g，蒸馏水1L，加热溶解校正pH6.5，115℃高压灭菌15-20分钟；

(2)菌悬液制备：青春双歧杆菌LJM-001接种于营养琼脂的斜面培养基，35±2℃厌氧培养24小时，用灭菌生理盐水将菌苔洗下，制成菌悬液，置2-8℃冰箱中保存；

(3)菌层平板制备：取直径约90mm、高16～17mm的平板，注入加热融化的筛检培养基20mL，使在碟底内均匀摊布，放置水平台上使凝固，作为底层；在已凝固的底层培养基(放冷至48～50℃)上加入菌悬液0.5mL，充分混匀，使在底层上均匀摊布，作为菌层；

(4)样品前处理：取待检的食品样品匀浆组织5g，用1％无菌磷酸盐缓冲液(pH6.0)25ml稀释，漩涡混匀，于80℃水浴加热5min，冷却后于5000r/min离心15min，取上清液作为供试样品液；

(5)样品测定：在菌层平板的培养皿中放置圆滤纸片(直径13±1mm)，用镊子轻压纸片，使纸片与培养基紧密接触，用微量移液器在圆滤纸片上滴加供试样品液90μl。每个供试样至少重复2个培养皿，35±2℃厌氧培养18～24小时，抑菌圈直径通过抑菌圈电脑测量分析仪测量；

(6)结果判定：当抑菌圈≥15mm，判断食品样品中乐果残留阳性(+)。

3.根据权利要求2所述的一株青春双歧杆菌LJM-001应用于食品乐果残留的筛检，其特征在于，其中步骤(1)所述的显色剂为5-溴-4-氯-3-吲哚-β-D半乳糖苷(X-Gal)。

4.根据权利要求2所述的一株青春双歧杆菌LJM-001应用于食品乐果残留的筛检，其特征在于，其中步骤(2)所述的菌悬液在721分光光度计580nm波长下光透过率控制为0.8。

5.根据权利要求2所述的一株青春双歧杆菌LJM-001应用于食品乐果残留的筛检，其特征在于，其中步骤(4)所述的食品样品包括白菜、茄子、黄瓜、南瓜、冬瓜、苹果、梨子、桃子等蔬菜水果。