[发明专利]一种脂肪链修饰的寡核苷酸的结构、制备方法及用途

说明书

技术领域

本发明涉及生物工程药物领域及有机合成领域，具体地说是一种脂肪链修饰的寡核苷酸的结构、制备方法及防治流感病毒感染的用途。

背景技术

流感病毒感染可引起急性呼吸道传染病。该病潜伏期短，传染性强，传播迅速。甲型流感威胁最大，且易发生变异，易引起暴发流行。1918年至1920年，著名的″西班牙流感″在全球范围内造成了2000万-4000万人死亡。此后，1957甲型流感病毒(H2N2)所致的″亚洲流感″、1968由甲型流感病毒(H3N2)所致的″香港流感″、1977年由甲型流感病毒(H1N1)所致的″俄罗斯流感″、1997年以来出现的高致病性禽流感病毒(AIV，avian influenza virus)，以及2009年出现的甲型流感病毒感染，都严重威胁了人们的健康和正常生活。流感作为急性呼吸道传染病严重威胁着人们的健康，对于儿童、老年人、其它慢性病患者等高危人群尤其严重，而且也已成为社会劳动力损失、医疗负担加重乃至社会不安定的主要原因之一。

由于流感病毒变异，常规疫苗不能有效预防流感的发生和流行。过去用于治疗流感的两种较低廉的抗病毒药物三环癸胺(amantadine)和金刚乙胺(remantadine)对人体内流感病毒几乎不起作用，且耐药较为普遍。新近上市的神经氨酸酶抑制剂(例如：达菲和帕纳米韦)虽效果较好，但随着临床广泛应用，耐药毒株分离的报道也相继出现。目前仍缺乏可靠的方法对流感的发生和流行进行有效的控制，有效的预防和控制流感病毒的方法已成当务之急。因此研究特异性高、毒副作用小的新型抗流感病毒药物对治疗与预防流感病毒感染相关性具有重要现实意义。

发明内容

本发明的目的根据流感病毒基因组设计并制备脂肪链修饰的寡核苷酸，以此可作为流感病毒感染的治疗药物。

本发明的主要内容是以流感病毒基因片段5’端保守序列为靶点，设计并合成与5’端互补的硫代寡核苷酸，并通过直接合成的方法在序列的3’端或5’端连入脂肪链(Flu-3-ZF，FLU-5-ZF)，以A型流感病毒代表株A1/京防/86-1(H1N1)和A3/鲁防/93-9(H3N2)、A/Beijing/073103/2009(金刚乙胺耐药的H3N2)为对象，以流感病毒致细胞病变(CPE)以及流感病毒的复制水平为指标，在A549细胞比较评价了FLU-3-ZF、FLU-5-ZF抑制流感病毒复制的作用，结果表明FLU-3-ZF、FLU-5-ZF能剂量依赖性地抑制流感病毒的复制。

根据本发明，FLU-3-ZF、FLU-5-ZF能特异性抑制流感病毒的复制，有可能成为治疗及预防流感病毒感染相关疾病的新型生物工程药物。

根据本发明，本发明的寡核苷酸修饰物可按本领域已知方法配成非肠道给药的制剂。

根据本发明，本发明的寡核苷酸修饰物治疗组成可应用单独的有效成分或组合物形式包括联合其他寡核苷酸及其衍生物形式，还可以含有治疗上可以接受的载体材料，如脂质体、融合肽或病毒载体等。

根据本发明，本发明的治疗组成，依不同情况包括特定药物的药物动力学、药代动力学、给药模式、给药途径、受者的年龄、体重、肝肾功能状态、疾病的性质、程度及治疗时限等，以适宜的剂量给药。

本发明的实施对严重危害人类健康的流感病毒感染的预防和治疗具有重要的社会效益和经济效益。

附图说明

图1 FLU-3-ZF，FLU-5-ZF合成路线图

图2 FLU-3-ZF，FLU-5-ZF剂量依赖性地抑制H1N1型流感病毒致细胞病变作用

图3 FLU-3-ZF，FLU-5-ZF剂量依赖性地抑制H3N2型流感病毒致细胞病变作用

图4 FLU-3-ZF，FLU-5-ZF剂量依赖性地抑制金刚乙胺耐药株H3N2型流感病毒致细胞病变作用

图5 FLU-3-ZF，FLU-5-ZF剂量依赖性地抑制H1N1型流感病毒的复制

图6 FLU-3-ZF，FLU-5-ZF剂量依赖性地抑制H3N2型流感病毒的复制

具体实施方式

实施例一

本实施例主要说明FLU-3-ZF的制备方法，主要技术要点如下(合成路线图见附图1)：

a)将二十二酸1(3.40g，10mmol)溶解于有机溶剂中，将氨基醇2(2.21g，15mmol)的溶液加入到其中，加入缩水剂DCC(2.27g，12mmol)，于0～60℃条件下搅拌1～12小时，蒸除溶剂后重结晶得浅黄色结晶3.28g，收率70％。(化合物3)。