[发明专利]一种肝水解肽注射液药物组合物

说明书

技术领域

本发明涉及一种治疗肝炎、肝硬化疾病的药物组合物，进一步讲是提供了一种肝水解肽注射液药物组合物，属于生化药学技术领域。

背景技术

现有的“肝水解肽注射液”为我国处方类药物，肌肉注射，用于慢性肝炎、肝硬化等疾病的辅助治疗，是由健康牛、猪的肝脏经酶水解提取制得的含有多肽类、核酸类、氨基酸类物质的无菌水溶液。肝水解肽能促进蛋白质合成，减少蛋白质分解，促进正常肝细胞的增殖和再生，对四氯化碳诱导的肝细胞损伤有较好的保护作用，降低谷丙转氨酶，促进病变组织恢复；但该药物对于肝炎、肝硬化疾病的治疗效果还是非常有限，根据国家药品标准中促肝细胞生长素活性测定法(MTT法)测定，肝水解肽注射液具有体外促进人肝细胞生长的活力，但活力刺激指数为仅为2.9左右。

发明内容

本发明公开一种肝水解肽注射液药物组合物，克服了“肝水解肽注射液”的活力刺激指数较低，治疗效果有限的缺欠。本发明还提供了该药物的制备方法，工艺简单，适用于工业化生产。

本发明提供的肝水解肽注射液组合物，其特征在于是由以下原料制成的：

浓度为9.2~12.2mg/ml的肝水解肽溶液1000ml、维生素C 2~5g、门冬氨酸钾镁注射液20~30ml、聚乙二醇200  10~20g。

所述的门冬氨酸钾镁注射液为每1ml含L-门冬氨酸85mg：钾11.4mg：4.2mg。

本发明提供肝水解肽注射液组合物的制备方法，包括如下步骤：

1、肝水解肽溶液

牛或猪的肝脏，去除结缔组织后，按0.83~0.85：1的重量份数与注射用水混合后，用高速组织捣碎机匀浆，升温至 37~40℃，用HCL调PH值为2.0~2.5，按3g/升加入胃蛋白酶，水解10~15小时，水解液用NaOH调节PH值为6.2~6.4，加1g/升硅藻土，90℃，加热30分钟，小型板框压滤机压滤，用0.45μm微孔过滤膜过滤，8000分子量超滤膜超滤得肝水解肽溶液，测定多肽含量，加注射用水调整溶液多肽浓度为9.2~12.2mg/ml；

2、在步骤1制备的肝水解肽溶液1000ml，加入2~5g 的维生素C，加入20~30ml的门冬氨酸钾镁注射液，加入10~20g 的聚乙二醇200，分装后121℃高压灭菌20分 钟，经检验合格得肝水解肽注射液组合物成品药物制剂。

以下实验表明本发明药物体外促进人肝细胞生长活力大为提高：

实验方法：促肝细胞生长素溶液国家药品标准：促肝细胞生长素活性测定法(MTT法，标准编号：WS-10001-(HD-0860)-2002)。

试验样品

1.1供试品：

原配方：肝水解肽溶液，含多肽11 mg/ml。

维生素C:用RPMI-1640培养液制成的每1ml中含维生素C 50μg的溶液。

门冬氨酸钾镁：用RPMI-1640培养液制成的每1ml中含L-门冬氨酸25.5μg、钾3.42μg、镁1.26μg的溶液。

实施例1制剂；

实施例2制剂；

实施例3制剂；

实施例4制剂；

1.2 对照品：注射用促肝细胞生长素，规格为20mg

2. 材料

2.1仪器：CO₂培养箱、水平台式离心机、酶标仪、甩板机、细胞培养瓶、细胞培养板、一次性针头滤器。             

2.2试剂:

 氯化钠、氯化钾、无水磷酸氢二钠、磷酸二氢钾、RPMI-1640　MEDIUM、碳酸氢钠、盐酸、氢氧化钠、小牛血清、胰蛋白酶、EDTA二钠、MTT、二甲基亚砜、人肝细胞株。

方法

3.1试剂的配制：

3.1.1 0.01mol/L磷酸盐缓冲液(pH7.3)  取氯化钠8.0g、氯化钾0.2g、磷酸氢二钠(Na2HPO4)1.15g及磷酸二氢钾0.2g，加超纯水1000ml溶解后，高压灭菌。

3.1.2 RPMI-1640培养液  取碳酸氢钠2.00g及RPMI-164010.0g加超纯水约800ml溶解后，用1mol/L盐酸溶液调节pH值至6.9，加超纯水稀释至1000ml，过滤除菌。