[发明专利]芪鹰颗粒的检测方法

权利要求书

1.一种芪鹰颗粒的检测方法，所述芪鹰颗粒的原料主要包括黄芪、丹参、黄精、鹰嘴豆、蝉蜕和乳糖，其特征在于所述检测方法包括含量测定,所述含量测定为采用高效液相色谱法对颗粒中的黄芪和丹参的主要的或典型的有效成分含量进行测定，并以此分别作为黄芪和丹参含量的判断指标。

2.根据权利要求1所述的芪鹰颗粒的检测方法，其特征在于所述黄芪的含量测定方法包括以下步骤：

色谱条件与系统适应性试验：用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以比例为35︰65的乙腈-水为流动相，柱温25℃，用蒸发光散射检测器检测，获得的理论塔板数按黄芪甲苷峰计算应不低于4000；

对照品溶液的制备：以甲醇为溶剂，配置浓度为0.0516-1.032mg/ml的黄芪甲苷对照品溶液；

供试品溶液的制备：将适量芪鹰颗粒溶于甲醇中，经超声提取60分钟以上，回收提取溶剂浓缩至干，残渣加水溶解，用水饱和的正丁醇振摇提取，用氨试剂洗涤正丁醇液，蒸干正丁醇，残渣加甲醇溶解，移至容量瓶中，加甲醇至刻度，制备芪鹰颗粒的甲醇溶液；

测定：分别精密吸取相同体积量的对照品溶液与供试品溶液，注入液相色谱仪，所吸取的体积量为10-20μl，进行测定，获得供试品溶液中的黄芪甲苷，并折算出所测试的芪鹰颗粒中的黄芪甲苷含量，以此作为黄芪含量的判断指标。

3.根据权利要求2所述的芪鹰颗粒的检测方法，其特征在于所述丹参的含量测定方法包括以下步骤：

色谱条件与系统适应性试验：用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以比例为30︰10︰1︰59的甲醇-乙腈-甲酸-水为流动相，柱温35℃，检测波长为286nm，获得的理论板数按丹酚酸B峰计算应不低于2000；

对照品溶液的制备：以75%甲醇为溶剂，配置浓度为14-70μg/ml的丹酚酸B溶液；

供试品溶液的制备：将芪鹰颗粒研细，称取适量细粉，溶于75%甲醇溶液中，超声处理30分钟以上，移至容量瓶中，加75%甲醇至刻度，摇匀，静置，取上层清液用孔径为0.45μm的微孔滤膜过滤，即得；

测定：分别精密吸取相同体积量的对照品溶液和供试品溶液注入液相色谱仪，所吸取的体积量为10-20μl，进行测定，获得供试品溶液中的丹酚酸B，并折算出所测试的芪鹰颗粒中的丹酚酸B含量，以此作为丹参含量的判断指标。

4.根据权利要求3所述的芪鹰颗粒的检测方法，其特征在于每袋芪鹰颗粒的丹参含量以丹酚酸B计不得少于35.0毫克，黄芪含量以黄芪甲苷计不得少于1.0毫克。

5.根据权利要求1、2、3、或4所述的芪鹰颗粒的检测方法，其特征在于所述检测方法还包括薄层色谱鉴别，所述薄层色谱鉴别为采用色谱法对颗粒中是否含有黄芪和丹参进行鉴别。

6.根据权利要求5所述的芪鹰颗粒的检测方法，其特征在于所述薄层色谱鉴别包括以下步骤：根据薄层色谱鉴别所针对黄芪和丹参，制备所需的供试品溶液和对照品溶液；吸取上述各溶液分别点于同一硅胶G薄层板上，以展开剂展开、去除、晾干；观察供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置处，是否具有相同颜色的荧光斑点。

7.根据权利要求6所述的芪鹰颗粒的检测方法，其特征在于所述黄芪的薄层色谱鉴别法包括以下步骤：取芪鹰颗粒，加乙醇，回流30分钟，过滤，蒸干滤液，残渣加0.3%氢氧化钠溶液溶解，过滤，采用稀盐酸调pH至5-6，用乙酸乙酯振摇提取，分取乙酸乙酯液，用铺有适量无水硫酸钠的滤纸过滤，蒸干滤液，残渣加乙酸乙酯溶解，制得供试品溶液；另取黄芪药材，同法制得对照药材溶液；吸取上述两种溶液，分别点于同一硅胶G薄层板上，以比例为10︰1的三氯甲烷-甲醇混合液为展开剂，展开，取出，晾干，置于紫外光灯下检视，在与对照药材色谱相应的位置上，是否显相同的荧光斑点。

8.根据权利要求7所述的芪鹰颗粒的检测方法，其特征在于所述丹参的薄层色谱鉴别法包括以下步骤：取芪鹰颗粒，加乙醚振摇，静置1小时，过滤，蒸干滤液，残渣加乙酸乙酯溶解，得到供试品溶液；另取丹参药材，同法制得丹参对照药材溶液；另取丹参酮ⅡA对照品，加入乙酸乙酯制得丹参酮ⅡA对照品溶液；吸取上述三种溶液，分别点于同一硅胶G薄层板上，以比例为19︰1的甲苯-乙酸乙酯混合液为展开剂，展开，取出，晾干，检视硅胶G薄层板上在与对照药材色谱相应的位置上，是否显相同颜色的斑点；检视在与丹参酮ⅡA对照品色谱相应的位置上，是否显相同的暗红色斑点。