[发明专利]一种分离纯化达托霉素的方法

权利要求书

1.一种分离纯化达托霉素的方法，包括下述步骤：

1)将达托霉素发酵液调节pH2.0-4.5后，用膜孔径为0.01μm-0.1μm的陶瓷膜进行过滤，然后用pH2.0-4.0的酸性水溶液循环洗涤陶瓷膜，弃滤液，再用pH8-10的碱性水溶液循环洗涤陶瓷膜，收集达托霉素滤液；

2)将步骤1)所得达托霉素滤液调节pH4.5-7.0，经弱碱性阴离子交换树脂吸附、洗脱后得到达托霉素解吸液；

3)将步骤2)所得达托霉素解吸液经大孔树脂吸附、解吸脱色后得达托霉素脱色液；

4)将步骤3)所得达托霉素脱色液经截留分子量为50-500的纳滤膜系统浓缩，得到达托霉素浓缩液；

5)将步骤4)所得达托霉素浓缩液调节pH5.0-7.0，然后加入无机钙盐和醇类溶剂进行结晶，晶体过滤干燥后得到固体达托霉素。

2.如权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤1)中洗涤所用的pH2.0-4.0酸性水溶液采用磷酸溶液，其用量是发酵液体积的1-2倍。

3.如权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤1)中所述碱性水溶液为氢氧化钠或氢氧化钾溶液，其用量为发酵液体积的4-5倍。

4.如权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤2)所述弱碱性阴离子交换树脂为D301树脂，其装填内径和高度比为1∶5～1∶7。

5.如权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤2)采用pH5.5-6.0的NaCl溶液将达托霉素从弱碱性阴离子交换树脂上洗脱下来。

6.如权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤3)所述大孔树脂为HZ20树脂，其装填内径和高度比为1∶5～1∶7。

7.如权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤3)用大孔树脂吸附达托霉素后，先用15％-20％乙醇溶液清洗大孔树脂，再用30％-35％的乙醇溶液将达托霉素洗脱下来。

8.如权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤4)所用纳滤膜的截留分子量为100-200。

9.如权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤5)中无机钙盐的加入量是浓缩液中所含达托霉素质量的30％～50％；醇类溶剂的加入量为浓缩液体积的3-6倍。

10.如权利要求9所述的方法，其特征在于，步骤5)中所述无机钙盐是下列钙盐中的一种或多种：乙酸钙和氯化钙；所述醇类溶剂为乙醇或异丙醇。