[发明专利]RNA胞体及其用途有效
申请号: | 201110197680.7 | 申请日: | 2011-07-15 |
公开(公告)号: | CN102876666A | 公开(公告)日: | 2013-01-16 |
发明(设计)人: | 孔五一 | 申请(专利权)人: | 内蒙古弘泰医学科技有限公司 |
主分类号: | C12N15/11 | 分类号: | C12N15/11;A61K48/00;A61P17/02 |
代理公司: | 中国国际贸易促进委员会专利商标事务所 11038 | 代理人: | 程泳 |
地址: | 100085 北京*** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | rna 及其 用途 | ||
1.分离的RNA胞体,其包含由膜包被的RNA,具有自我更新的能力,且直径为0.1-1μm。
2.权利要求1的RNA胞体,其是c-kit阳性的。
3.权利要求1或2的RNA胞体,其是VASA阳性的。
4.权利要求1-3任一项的RNA胞体,其是E-cadherin阴性的。
5.权利要求1-4任一项的RNA胞体,其表达CD29、CD90、CXCR4、CD45、CD34、HiLi和Sca1中的一种或多种。
6.权利要求1-5任一项的RNA胞体,其所包含的RNA占总核酸的50%以上,并且在所述RNA中,有至少40%是miRNA。
7.权利要求6的RNA胞体,其中所述miRNA包括表1所列的miRNA的一种或多种。
8.权利要求1-7任一项的RNA胞体,其能够发生聚集和融合,形成融合体。
9.权利要求8的RNA胞体,其中所述融合体包含膜和内含物,且能够经历下述过程:所述膜变薄,所述内含物中的DNA增加,而RNA减少。
10.权利要求1-9任一项的RNA胞体,其具有参与和/或促进组织再生和伤口修复的能力。
11.权利要求1-10任一项的RNA胞体,其能够从动物例如哺乳动物(包括人和小鼠)的血液和骨髓获得。
12.权利要求1-11任一项的RNA胞体,其能够通过以下方法获得:
1)提供动物(例如哺乳动物,例如人和小鼠)的血液并裂解血液中的细胞,例如使用细胞裂解液裂解血液中的细胞;
2)静置至少5分钟(例如10分钟,15分钟或更长),然后去除裂解产物的上层液体部分,而保留底层沉淀部分,该底层沉淀部分包含RNA胞体集落;
3)任选地洗涤底层沉淀部分,例如使用PBS进行洗涤;
4)将所述底层沉淀部分置于培养基中进行培养,RNA胞体集落释放出RNA胞体,由此从培养物中获得RNA胞体。
13.权利要求1-12任一项的RNA胞体,其能够针对c-kit标记的存在而进行富集和/或分离,
例如,可以通过使用能够特异性结合c-kit的制剂例如c-kit抗体来富集和/或分离所述RNA胞体。
14.由权利要求1-13任一项的RNA胞体融合而形成的融合体。
15.包含权利要求1-13任一项的RNA胞体以及权利要求14的融合体的RNA胞体集落,其例如可以通过下述方法获得:
1)提供动物(例如哺乳动物,例如人和小鼠)的血液并裂解血液中的细胞,例如使用细胞裂解液裂解血液中的细胞;
2)静置至少5分钟(例如10分钟,15分钟或更长),然后去除裂解产物的上层液体部分,而保留底层沉淀部分,该底层沉淀部分包含RNA胞体集落;
3)任选地洗涤底层沉淀部分,例如使用PBS进行洗涤;
4)将所述底层沉淀部分置于培养基中进行培养,从而获得RNA胞体集落。
16.包含权利要求1-13任一项的RNA胞体和/或权利要求14的融合体和/或权利要求15的RNA胞体集落的组合物。
17.权利要求1-13任一项的RNA胞体和/或权利要求14的融合体和/或权利要求15的RNA胞体集落和/或权利要求16的组合物用于制备药物组合物的用途,所述药物组合物用于组织再生和伤口修复。
18.分离权利要求1的RNA胞体和权利要求15的RNA胞体集落的方法,其包括:
1)提供动物(例如哺乳动物,例如人和小鼠)的血液并裂解血液中的细胞,例如使用细胞裂解液裂解血液中的细胞;
2)静置至少5分钟(例如10分钟,15分钟或更长),然后去除裂解产物的上层液体部分,而保留底层沉淀部分,该底层沉淀部分包含RNA胞体集落;
3)任选地洗涤底层沉淀部分,例如使用PBS进行洗涤;
4)将所述底层沉淀部分置于培养基中进行培养,RNA胞体集落释放出RNA胞体,由此从培养物中获得RNA胞体和RNA胞体集落。
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