[发明专利]RNA胞体及其用途

说明书

技术领域

本发明涉及生物学领域，尤其是细胞学和组织学领域。特别地，本发明涉及一种可再生的RNA胞体，其包含RNA并且表达通常只在原始精母细胞中表达的RNA结合蛋白VASA。这些RNA胞体还表达c-kit，但不是表达在胞体表面，而是表达在胞体内RNA的部位。此外，这些RNA胞体不表达E-cadherin。本发明还涉及上述RNA胞体的用途，其例如可以用于促进组织再生和伤口修复(例如通过静脉注射的方式)，因为这些胞体具有进一步分化成组织特异细胞的潜能。本发明还涉及上述RNA胞体用于制备药物组合物的用途，以及包含上述RNA胞体的药物组合物。

背景技术

外伤、缺血和纤维化疾病可导致组织损伤。作为组织损伤的结果，不同的组织或器官，例如皮肤、肝脏和心脏会产生疤痕。对于皮肤上较大的疤痕，由于缺乏有效的治疗方法，会给病人带来长期的心理和生理上的负担。在心血管系统疾病中，急性心脏病发作可由心肌细胞缺血引起，其可能导致心脏组织的坏死，并且坏死的细胞会被成纤维细胞取代进而形成疤痕。因此，寻找组织或器官损伤的再生治疗方法一直是临床上十分关注的问题。

虽然干细胞被认为具有再生组织的巨大潜能，但一些研究结果的结论是自相矛盾的，例如在利用成人的骨髓干细胞再生心肌细胞方面。

一方面，尽管已报道骨髓或血液来源的造血干细胞参与造血谱系之外的组织(例如肌肉，神经元，肝细胞等其他组织)的发育和再生，但迄今为止，仍未明确鉴定到具有多系潜能的特定骨髓或血液来源的干细胞亚群。另外，还有报道称，传统的骨髓干细胞在体外培养后会丧失再生组织的能力。

另一方面，虽然已报道骨髓干细胞具有自我更新的能力，例如，干细胞维持恒定的数目并同时为组织提供祖细胞，但这些干细胞的自我更新机制仍不清楚。有报道称，干细胞通过不对称分裂来实现自我更新与定向分化，然而单个细胞如何能够分裂产生2种具有不同命运的细胞是完全不清楚的。

因此，目前在使用干细胞来进行再生治疗方法方面仍存在着很多问题。本领域仍然迫切需要新的有效的再生治疗方法。

在低等生物中，原始生殖细胞(PGC)形成于特定的种质中，该种质是卵母细胞的细胞质成分，由线粒体衍生物和电子密集体聚集而成。其中电子密集颗粒富含来自母体的RNA。该种质在形态上与体细胞的细胞质不同，它表达几种未在其它组织和细胞类型中发现的特异性分子标记。其中一种分子标记是VASA，它是一种DEAD-box RNA结合蛋白。在斑马鱼中，生殖细胞系形成前，vasa基因的RNA发生不对称地分离。在果蝇卵中，将后极胞质移植入前极或移植入UV照射过的后极区域仍能维持PGC的正常形成，这提示种质RNA对于PGC的形成是必不可少的。这一点进一步得到下述事实的支持：沉默VASA会抑制PGC的形成和发展。果蝇vasa基因与真核细胞的起始因子4A(eIF4A)相类似。VASA有几种功能，其中一种是与eIF5B结合，后者是必须的翻译起始因子，诱导核糖体亚单位的组装；另一种功能是在早期生殖细胞中调节mei-P26的翻译，进而促进生殖细胞的进一步分化。这些报道表明在果蝇生殖细胞的形成过程中种质和VASA起着非常重要的作用。虽然哺乳动物中，种质并不是PGC的来源，但对形成胚胎非常重要，因为对克隆羊来说必不可少的物质是卵母细胞的种质和体细胞的细胞核。

本发明人意外地在血液中发现了一种RNA胞体，其包含RNA以及与RNA结合的VASA蛋白。该RNA胞体，例如经血液移植后，能够促进组织再生和伤口修复，从而为再生治疗方法提供了新的选择。

发明内容

在本发明中，除非另有说明，否则本文中使用的科学和技术名词具有本领域技术人员所通常理解的含义。并且，本文中所用的免疫学、分子生物学、细胞生物学实验室操作步骤均为相应领域内广泛使用的常规步骤。同时，为了更好地理解本发明，下面提供相关术语的定义和解释。

如本文中使用的，术语“RNA胞体(RNA body)”是指，包含由膜包被的RNA的小体，其直径一般为0.1-1μm，并且具有自我更新的能力。RNA胞体不同于本领域所公知的真核细胞，表现在它们没有典型的细胞核，细胞器及细胞膜。RNA胞体也不同于目前已知的原核细胞，表现在其表面没有膜或壳等原核细胞膜结构。RNA胞体的表面蛋白主要是血浆蛋白，并且蛋白层的厚度可随着RNA胞体的分化和成熟而变薄(见图11-12)。本发明的RNA胞体可从动物例如例如哺乳动物(包括人和小鼠)的血液和骨髓中分离获得。