[发明专利]一种定量检测透明质酸片段结构变化的方法

权利要求书

1.  一种定量检测透明质酸片段结构变化的方法，其特征在于包括如下步骤：

1）将透明质酸片段用透明质酸酶酶解，然后采用高效液相色谱法测定透明质酸片段的含量；

2）将透明质酸片段采用咔唑法测定透明质酸片段的含量；

3）将步骤2）的测定值减去步骤1）的测定值，即为透明质酸片段结构变化的量。

2.  根据权利要求1所述的定量检测透明质酸片段结构变化的的方法，其特征在于所述的步骤1）包括以下步骤： 

a）样品预处理

精密称取透明质酸对照品和透明质酸片段样品适量分别置于50ml容量瓶中，用醋酸钠缓冲液溶解并定容，加入透明质酸酶，37℃水浴2h；

b）色谱条件 

在本发明的高效液相色谱测定中，采用糖分析柱；流动相为0.5-1.0 mol/L的磷酸盐缓冲液；流速为0.3-1.0 ml/min；柱温为30±5℃；检测波长235±5nm；进样量为20μL；

c）结果计算

采用高效液相色谱分别对对照品酶解液和样品酶解液进行色谱分离，按外标法以峰面积计算样品含量。