[发明专利]一种考马斯亮蓝G250染色方法及其专用染色液和应用无效
| 申请号： | 201110203877.7 | 申请日： | 2011-07-20 |
| 公开（公告）号： | CN102288470A | 公开（公告）日： | 2011-12-21 |
| 发明（设计）人： | 王旭初;郭安平;王海燕;王东阳 | 申请（专利权）人： | 中国热带农业科学院热带生物技术研究所 |
| 主分类号： | G01N1/30 | 分类号： | G01N1/30 |
| 代理公司： | 暂无信息 | 代理人： | 暂无信息 |
| 地址： | 571101*** | 国省代码： | 海南;66 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 马斯 g250 染色 方法 及其 专用 应用 | ||
1.一种考马斯亮蓝G250染色液，其特征是含有以下组分：质量体积浓度为0.1-0.2％的CBBG-250，质量体积浓度为5-15％的硫酸铵，体积百分含量为3-8％的磷酸，体积百分含量为20-40％的乙醇，体积百分含量为5-20％的甲醇。
2.根据权利要求1所述的考马斯亮蓝G250染色液，其特征是：所述的CBB G-250的质量体积浓度为0.12-0.13％，所述的硫酸铵的质量体积浓度为8-12％，所述的磷酸的体积百分含量为4-6％，所述的乙醇的体积百分含量为20-30％，所述的甲醇的体积百分含量为10-15％。
3.根据权利要求1所述的考马斯亮蓝G250染色液，其特征是：所述的CBB G-250的质量体积浓度为0.125％，所述的硫酸铵的质量体积浓度为10％，所述的磷酸的体积百分含量为5％，所述的乙醇的体积百分含量为30％，所述的甲醇的体积百分含量为10％。
4.利用权利要求1-3任一项所述的考马斯亮蓝G250染色液进行染色的方法，其特征是含有以下步骤：将SDS-PAGE胶置于上述考马斯亮蓝染色液G250中，进行染色，再将染色后的SDS-PAGE胶转移至脱色液中，振荡脱色直到背景干净为止。
5.根据权利要求4所述的利用所述的考马斯亮蓝G250染色液进行染色的方法，其特征是：所述的SDS-PAGE胶置于上述考马斯亮蓝染色液G250前先置于ddH2O中振荡2-10min。
6.根据权利要求4所述的利用所述的考马斯亮蓝G250染色液进行染色的方法，其特征是：染色时间为3-24h。
7.根据权利要求4所述的利用所述的考马斯亮蓝G250染色液进行染色的方法，其特征是：所述的脱色液含有体积百分含量为20-40％的乙醇和体积百分含量为1-10％的乙酸。
8.根据权利要求4所述的利用所述的考马斯亮蓝G250染色液进行染色的方法，其特征是：振荡脱色的时间为2-3h。
9.根据权利要求4所述的利用所述的考马斯亮蓝G250染色液进行染色的方法，其特征是：所述的SDS-PAGE胶为单向胶，其含有质量百分含量为10-15％的聚丙烯酰胺分离胶和质量百分含量为1-5％的聚丙烯酰胺浓缩胶；或所述的SDS-PAGE胶为双向胶，其含有质量百分含量为10-15％的聚丙烯酰胺分离胶。
10.权利要求4所述的方法在蛋白质的定性和/或定量检测中的应用。
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