[发明专利]一种产脂肪氧合酶的基因工程菌及其构建方法和应用无效
| 申请号： | 201110212307.4 | 申请日： | 2011-07-28 |
| 公开（公告）号： | CN102268400A | 公开（公告）日： | 2011-12-07 |
| 发明（设计）人： | 陈坚;堵国成;陆信曜;张东旭;宗伟刚;蒋晓东;孙福新 | 申请（专利权）人： | 江南大学;宜兴协联生物化学有限公司 |
| 主分类号： | C12N1/21 | 分类号： | C12N1/21;C12N15/70;C12N9/02;C12R1/19 |
| 代理公司： | 北京汇信合知识产权代理有限公司 11335 | 代理人： | 王秀丽 |
| 地址： | 214122 江*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 脂肪 氧合酶 基因工程 及其 构建 方法 应用 | ||
【权利要求书】：
1.一种产脂肪氧合酶的基因工程菌，其特征在于，所携带的质粒上含有脂肪氧合酶基因。
2.权利要求1所述的基因工程菌，其特征在于，是将脂肪氧合酶基因导入大肠杆菌。
3.权利要求1或2所述的基因工程菌，其特征在于，所述脂肪氧合酶基因来源于CCTCC NO：M 2011185。
4.权利要求1或2所述的基因工程菌，其特征在于，所述脂肪氧合酶基因位于表达载体pET22b上。
5.一种权利要求1所述基因工程菌的构建方法，其特征在于，包括如下步骤：
第一步：以CCTCC NO：M 2011185基因组为模板PCR克隆得到脂肪氧化酶基因；
第二步：克隆脂肪氧合酶基因到表达载体pET22b；
第三步：将所得的表达载体转化宿主大肠杆菌，构建高效表达脂肪氧合酶的诱导型大肠杆菌基因工程菌。
6.一种权利要求1所述大肠杆菌工程菌在脂肪氧合酶生产中的应用。
7.权利要求6所述的方法，其特征在于，每升发酵培养基组成如下：
蛋白胨 12 g，酵母提取物 24 g，甘油 4 mL， 2.31 g KH2PO4和12.54 g K2HPO4。
8.权利要求7所述的方法，其特征在于，各组分溶解后高压灭菌，冷却到60℃，再加灭菌后的磷酸盐缓冲溶液。
9.权利要求8所述的方法，其特征在于，所述磷酸盐缓冲溶液的灭菌采用高压灭菌或滤膜过滤除菌。
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