[发明专利]一种利用近红外光谱快速测定片仔癀质量的方法

权利要求书

1.一种利用近红外光谱快速测定片仔癀质量的方法，其特征在于该方法包括如下步骤：

(1)收集具有代表性的片仔癀样品作为训练集；

(2)高效液相法测定训练集中片仔癀样品的质量指标；

(3)将训练集中的样品分为校正集和验证集两部分，校正集和验证集中的样品数目比例为3～5∶1，测定训练集中片仔癀样品的近红外光谱数据，并对近红外光谱数据进行预处理，其预处理后的光谱数据作为变量；

(4)用多元校正方法将步骤(3)预处理后的光谱数据与步骤(2)测定的质量指标进行关联，建立校正模型；

(5)采用内部交叉检验对校正模型进行验证，评价预测值和真值的相关性；利用校正模型对验证集中片仔癀样品进行质量预测，化学测定值与预测值的平均相对误差应小于5％；

(6)用验证过的校正模型测定待测片仔癀的质量：取待测片仔癀，测定其近红外光谱数据，并经过与步骤第(3)相同的预处理，利用步骤(4)建立的校正模型，测定片仔癀的质量指标；

所述具有代表性的片仔癀样品，是指样品的质量指标必须能够涵盖所期望的变化范围，而且在这个变化范围内是均匀分布的。

2.如权利要求1所述的利用近红外光谱快速测定片仔癀质量的方法，其特征在于步骤(2)所述的质量指标是三七皂苷R1含量、人参皂苷Rg1含量、人参皂苷Rb1含量或该三类成分总的含量。

3.如权利要求1所述的利用近红外光谱快速测定片仔癀质量的方法，其特征在于步骤(2)所述高效液相法测定按如下条件进行：

色谱条件：色谱柱为Welch Materials C18色谱柱，规格：250mm×4.6mm，5μm；检测波长为203nm；流速为1ml/min；柱温为25℃；流动相：乙腈-水，其中0～32min，乙腈与水的体积比为79∶21；32～65min，乙腈与水的体积比由79∶21逐渐降为60∶40；理论塔板数按三七皂苷R1峰计算应不低于2500；

对照品溶液的制备：精密称取人参皂苷Rg₁对照品、人参皂苷Rb₁对照品和三七皂苷R₁对照品适量，加甲醇制成每1体积份含人参皂苷Rg₁0.4重量份、人参皂苷Rb₁0.4重量份、三七皂苷R₁0.1重量份的混合溶液，即得；

供试品溶液的制备：取片仔癀样品，粉碎，研细，过5号筛(即80目筛)，取400～600重量份，精密称定，精密加入甲醇20～30体积份，称定重量，置水浴上保持微沸0.5～1.5小时，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得；

样品含量的测定：按照所述色谱条件对样品进行含量测定；每批样品的测定结果为2次测量的平均值。

4.如权利要求1所述的利用近红外光谱快速测定片仔癀质量的方法，其特征在于步骤(3)中测定训练集中片仔癀样品的近红外光谱数据的方法为：直接扫描片仔癀样品的近红外光谱图，或将片仔癀样品粉碎，过筛，取片仔癀粉末，测定其近红外光谱。

5.如权利要求4所述的利用近红外光谱快速测定片仔癀质量的方法，其特征在于近红外光谱的测样方式为：积分球漫反射，分辨率为8cm^-1；扫描次数64次；扫描范围：12500～4000cm^-1；每批样品测量4次。

6.如权利要求1所述的利用近红外光谱快速测定片仔癀质量的方法，其特征在于步骤(3)中光谱预处理方法包括：未处理、一阶导数、二阶导数、矢量归一化、直线相减、最小-最大归一化、多元散射校正、常偏移量消除或一阶导数光谱。

7.如权利要求6所述的利用近红外光谱快速测定片仔癀质量的方法，其特征在于步骤(3)中光谱预处理方法为最小-最大归一化、一阶导数、矢量归一化或多元散射校正。

8.如权利要求1所述的利用近红外光谱快速测定片仔癀质量的方法，其特征在于步骤(4)中用多元校正方法为：多元线性回归法、主成分回归法或偏最小二乘回归法。

9.如权利要求8所述的利用近红外光谱快速测定片仔癀质量的方法，其特征在于步骤(4)中用多元校正方法为偏最小二乘回归法。

10.如权利要求1所述的利用近红外光谱快速测定片仔癀质量的方法，其特征在于步骤(4)中近红外光谱的建模波段为4000～8000cm^-1。