[发明专利]一种利用近红外光谱快速测定片仔癀质量的方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种快速测定片仔癀质量的方法，特别涉及一种利用近红外光谱快速测定片仔癀质量的方法，属医药领域。

背景技术

片仔癀是由牛黄、三七、蛇胆、麝香等制成的锭剂，气微香，味苦、微甘。具有消炎、清凉解毒、消肿止痛等作用，对急性肝炎、眼炎、耳炎、痈疽疔疮、无名肿毒、跌打损伤及一切炎症引起的疼痛、发热等症均有疗效；并能抑制消化系统癌细胞的生长。片仔癀是国家一级中药保护品种，其独特的疗效得到了国内外市场的认可，与此同时市场上假冒片仔癀的现象也非常多。片仔癀国家标准的质量检测方法多采用薄层色谱法、气相色谱法、高效液相色谱法等，但这些方法存在样品前处理复杂，检测时间长，检测成本高、污染环境等问题，而且多为离线检测，无法快速监测片仔癀质量。因此，有必要研究出一种快速、准确、高效的检测片仔癀质量的方法。

近红外光谱指可见光谱区到中红外光谱区之间的电磁波，通常将近红外谱区的范围定义为780～2526nm(12820～3959cm^-1)，光谱信息来源于分子内部振动的倍频与合频，并且主要反映分子中C-H、N-H、O-H基团的倍频和合频振动吸收，其化学信息量相当丰富。因此，适合近红外光谱测量的物质种类范围和场合十分广泛，可用于非破坏性测定、原位分析、在线分析、活体分析等。本发明正是在利用近红外光谱特性的基础上开展了快速测定片仔癀质量的方法研究。

发明内容

本发明目的在于提供一种利用近红外光谱快速测定片仔癀质量的方法。

本发明目的是通过如下技术方案实现的。

本发明提供的利用近红外光谱快速测定片仔癀质量的方法包括如下步骤：

(1)收集具有代表性的片仔癀样品作为训练集；所述具有代表性的片仔癀样品，是指样品的质量指标必须能够涵盖所期望的变化范围，而且在这个变化范围内是均匀分布的；所述的质量指标可以是片仔癀中三七中的皂苷类成分的含量，如三七皂苷R₁含量、人参皂苷R_g1含量、人参皂苷R_b1含量或该三类成分总的含量；

(2)高效液相法测定训练集中片仔癀样品的质量指标----化学测定值；

(3)将训练集中的样品随机分为校正集和验证集两部分，校正集和验证集中的样品数目比例为3～5∶1；测定训练集中校正集(62批)、验证集(16批)片仔癀样品的近红外光谱数据，并对近红外光谱数据进行预处理，其预处理后的光谱数据作为变量；

(4)用多元校正方法将步骤(3)预处理后的光谱数据与步骤(2)测定的质量指标进行关联，建立校正模型；

(5)采用内部交叉检验对校正模型进行验证，评价预测值和真值(即步骤(2)测定的质量指标)的相关性；利用校正模型对验证集中片仔癀样品进行质量预测，化学测定值与预测值的平均相对误差应小于5％；

(6)用验证过的校正模型测定待测片仔癀的质量：取待测片仔癀，测定其近红外光谱数据，并经过与步骤第(3)相同的预处理，利用步骤(4)建立的校正模型，测定片仔癀的质量指标。

步骤(2)所述高效液相法测定可以按如下条件进行：

色谱条件：色谱柱为Welch Materials C18色谱柱，规格：250mm×4.6mm，5μm；检测波长为203nm；流速为1ml/min；柱温为25℃；流动相：乙腈-水，其中0～32min，乙腈与水的体积比为79∶21；32～65min，乙腈与水的体积比由79∶21逐渐降为60∶40；理论塔板数按三七皂苷R1峰计算应不低于2500；

对照品溶液的制备：精密称取人参皂苷Rg₁对照品、人参皂苷Rb₁对照品和三七皂苷R₁对照品适量，加甲醇制成每1体积份含人参皂苷Rg₁0.4重量份、人参皂苷Rb₁0.4重量份、三七皂苷R₁0.1重量份的混合溶液，即得；

供试品溶液的制备：取片仔癀样品，粉碎，研细，过5号筛(即80目筛)，取400～600重量份，精密称定，精密加入甲醇20～30体积份，称定重量，置水浴上保持微沸0.5～1.5小时，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得；

样品含量的测定：按照所述色谱条件对样品进行含量测定；每批样品的测定结果为2次测量的平均值。

本发明所述重量份/体积份的单位对应关系为mg/ml的对应关系。