[发明专利]一种利用大气压冷等离子体提高细胞膜通透性的方法有效
申请号: | 201110222265.2 | 申请日: | 2011-08-04 |
公开(公告)号: | CN102321606A | 公开(公告)日: | 2012-01-18 |
发明(设计)人: | 董晓宇;刘婷婷 | 申请(专利权)人: | 大连大学 |
主分类号: | C12N13/00 | 分类号: | C12N13/00 |
代理公司: | 大连东方专利代理有限责任公司 21212 | 代理人: | 贾汉生 |
地址: | 116622 辽宁*** | 国省代码: | 辽宁;21 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 利用 大气压 等离子体 提高 细胞膜 通透 方法 | ||
1.一种利用大气压冷等离子体提高细胞膜通透性的方法,用大气压冷等离子体作用于微生物细胞悬浮液,其特征在于:所述的作用方式为,将微生物细胞悬浮液载于石英载片,置于等离子体放电区,放电区金属电极间距为1~12mm,外加电压0.5~100kV,频率0~50MHz,作用时间为10s~25min,作用温度为15~45℃;其中,放电区的工作气体为下述一种或几种的混合物:空气、氮气、氩气、氦气。
2.根据权利要求1所述的一种方法,其特征在于:所述的电极间距为3~4mm,外加电压12kV,频率20MHz,作用时间为30s~240s,作用温度为25℃,工作气体为空气。
3.根据权利要求1或2所述的一种方法,其特征在于所述电极是下述的一种:铜、铝、不锈钢。
4.根据权利要求3所述的一种方法,其特征在于所述电极是不锈钢。
5.根据权利要求1或4所述的一种方法,其特征在于所述电极是平板型或同轴型。
6.根据权利要求5所述的一种方法,其特征在于所述电极是平板型。
7.根据权利要求1或6所述的一种方法,其特征在于所述微生物为原核微生物或真核微生物,细胞悬浮液中的细胞个数为1×105~1×109个/mL。
8.根据权利要求7所述的一种方法,其特征在于所述的原核微生物为克雷伯氏菌(Klebsiella pneumoniae),细胞悬浮液中的细胞个数为1×107个/mL。
9.根据权利要求7所述的一种方法,其特征在于所述的真核微生物为酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae),细胞悬浮液中的细胞个数为5×105个/mL。
10.根据权利要求8或9所述的一种方法,其特征在于细胞悬浮液的制备方法为,在无菌条件下,将培养至对数期的菌液收集、8000~10000r/min,0~4℃,离心20~30min、用0.05mol/L,磷酸钾缓冲液洗涤两次后,用磷酸钾缓冲液稀释制得,其中,所述磷酸钾缓冲液的浓度为0.05mol/L,pH为7.0。
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