[发明专利]甲1/甲3型流感病毒核酸双重荧光定量PCR检测试剂盒无效
申请号: | 201110223953.0 | 申请日: | 2011-08-05 |
公开(公告)号: | CN102251062A | 公开(公告)日: | 2011-11-23 |
发明(设计)人: | 张旭;王国强;刘中华;魏赵延;严浩荣 | 申请(专利权)人: | 江苏硕世生物科技有限公司 |
主分类号: | C12Q1/70 | 分类号: | C12Q1/70;C12Q1/68;C12R1/93 |
代理公司: | 南京正联知识产权代理有限公司 32243 | 代理人: | 卢霞 |
地址: | 225300 江苏省泰州市开发区寺巷富野*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 流感病毒 核酸 双重 荧光 定量 pcr 检测 试剂盒 | ||
1.甲1/甲3型流感病毒核酸双重荧光定量PCR检测试剂盒,其特征在于,包括RNA酶抑制剂、RT-PCR反应液、酶混合液、甲1/甲3型流感病毒双重反应液、阳性对照和阴性对照,
其中,
所说的RT-PCR反应液包括10×缓冲液、MgCl2和dNTPs;
所说的甲1/甲3型流感病毒双重反应液包括以下组分:
组分(1):由一对检测甲1型流感病毒的引物和一条检测甲1型流感病毒的探针组成;其中,两条引物的碱基序列分别为SEQ ID No.1和SEQ ID No.2所示;探针的碱基序列为SEQ ID No.3所示,该探针的5′端标记有荧光报告基团,3′端标记有荧光淬灭基团;
组分(2):由一对检测甲3型流感病毒的引物和一条检测甲3型流感病毒的探针组成;其中,两条引物的碱基序列分别为SEQ ID No.4和SEQ ID No.5所示;探针的碱基序列为SEQ ID No.6所示,该探针的5′端标记有荧光报告基团,3′端标记有荧光淬灭基团;
所说的酶混合液包括Taq酶和逆转录酶。
2.根据权利要求1所述的甲1/甲3型流感病毒核酸双重荧光定量PCR检测试剂盒,其特征在于,所说的检测甲1型流感病毒的引物及探针的配比分别为:SEQ ID No.1:SEQ ID No.2: SEQ ID No.3为500nM: 500nM: 200nM;所说的检测甲3型流感病毒的引物及探针的配比分别为:SEQ ID No.4:SEQ ID No.5: SEQ ID No.6 为600nM: 600nM: 200nM。
3.根据权利要求1所述的甲1/甲3型流感病毒核酸双重荧光定量PCR检测试剂盒,其特征在于,所说的荧光报告基团选自FAM、HEX、ROX、CY3或CY5荧光报告基团;所述的荧光淬灭基团选自BHQ1、BHQ2或BHQ3荧光淬灭基团。
4.根据权利要求1所述的甲1/甲3型流感病毒核酸双重荧光定量PCR检测试剂盒,其特征在于,所说的逆转录酶为M-MLV逆转录酶,所说的Taq酶为热启动Taq酶。
5.根据权利要求1所述的甲1/甲3型流感病毒核酸双重荧光定量PCR检测试剂盒,其特征在于,所说的阳性对照为灭活的病毒培养液;所说的阴性对照为去RNA酶水。
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