[发明专利]一种酶转化生产L-鸟氨酸硝酸盐的方法

权利要求书

1.一种酶转化生产L-鸟氨酸硝酸盐的方法，其特征在于，该方法包括如下步骤：

(1)固定化酶的制备

取三乙醇胺阴离子苯乙烯树脂，用碳酸钾溶液浸泡6-18h、过滤，滤干后加入碳酸钾溶液和溴化钾溶液，于冰浴中反应5-60min，采用冷碳酸氢钠溶液调节pH值至7-10，再加入精氨酸酶溶液，于1-10℃反应12-48h，再依次用碳酸氢钠、氯化钠、去离子水洗涤，最后用饱和食盐水浸泡0.5-3h，再洗净即制得固定化酶，保存于水中；所述的三乙醇胺阴离子苯乙烯树脂与碳酸钾、溴化钾、精氨酸酶的质量比为1∶(0.3-1.4)∶(0.1-1.4)∶(0.001-0.01)；

(2)L-鸟氨酸硝酸盐的制备

将步骤(1)中制得的固定化酶与精氨酸、乙酸锰按质量比1∶(1-3)∶(0.002-0.008)混合，溶于去离子水中，采用硝酸调节pH值至5-6，在30-50℃下，搅拌反应6-10h，过滤；

(3)L-鸟氨酸硝酸盐的分离纯化

在步骤(2)过滤得到的滤液中加入活性炭，用硝酸调节pH值至2-5.5，于40-90℃下搅拌反应5-30min后，过滤，将滤出液浓缩至有结晶析出，停止浓缩，加入乙醇，搅拌0.5-3h，析出L-鸟氨酸硝酸盐，过滤、干燥即得产品。

2.根据权利要求1所述的一种酶转化生产L-鸟氨酸硝酸盐的方法，其特征在于，步骤(1)所述的三乙醇胺阴离子苯乙烯树脂与碳酸钾、溴化钾、精氨酸酶的质量比为1∶(0.35-0.55)∶(0.4-1)∶(0.008-0.01)。

3.根据权利要求1所述的一种酶转化生产L-鸟氨酸硝酸盐的方法，其特征在于，步骤(1)所述的碳酸钾溶液的摩尔浓度为1-5M，溴化钾是质量浓度为1-4g/ml的溶液，所述的精氨酸酶是质量浓度为1-4g/l的溶液，所述的冷碳酸氢钠溶液的摩尔浓度为0.05-2M。

4.根据权利要求1所述的一种酶转化生产L-鸟氨酸硝酸盐的方法，其特征在于，步骤(1)所述的洗涤是依次利用0.05-0.3M的碳酸氢钠溶液，0.5-4M的氯化钠溶液和去离子水各洗涤2-5次，每次用量为100-400ml。

5.根据权利要求1所述的一种酶转化生产L-鸟氨酸硝酸盐的方法，其特征在于，步骤(1)所述的饱和食盐水的加入量以能浸没固定化酶为准。

6.根据权利要求1所述的一种酶转化生产L-鸟氨酸硝酸盐的方法，其特征在于，步骤(2)所述的固定化酶与精氨酸、乙酸锰按质量比1∶(1.4-1.6)∶(0.004-0.006)。

7.根据权利要求1所述的一种酶转化生产L-鸟氨酸硝酸盐的方法，其特征在于，步骤(2)所述的硝酸的加入量根据pH值确定。

8.根据权利要求1所述的一种酶转化生产L-鸟氨酸硝酸盐的方法，其特征在于，步骤(2)所述的搅拌反应的搅拌速度为60-200rpm。

9.根据权利要求1所述的一种酶转化生产L-鸟氨酸硝酸盐的方法，其特征在于，所述的步骤(3)中活性炭的加入量为1-6g/100ml滤液。