[发明专利]一种提取纯化枸橘苷的方法

说明书

技术领域

本发明属于天然药物领域，涉及以柑橘属植物枳实为原料提取纯化枸橘苷的方法。

背景技术

枳实（Fructus Aurantii Immaturus）来源于芸香科（Rutaceae）柑橘属（Citrus）酸橙未成熟果实，又名枸橘，是一味常用中药，首载于《神农本草经》，列于中品，具有破气、行痰、消积等功效。枳实主要成分为黄酮类，包括枸橘苷、新橙皮苷、橙皮苷、橙皮素、柚皮苷、柚皮素等。而其中枸橘苷的研究较少。

枸橘苷（poncirin），又名枸橘甙，枳属甙，分子式为C₂₈H₃₄O₁₄，分子量为594.56，分子结构式为

罗容等研究表明，枳实70%乙醇提取物具有抗氧化作用，其抗氧化药效组分比例关系为柚皮苷-橙皮苷-枸橘苷-新橙皮苷-柚皮素-橙皮素（223.66:18.50:254.49:321.00:4.46:1）。于磊等从铁篱巴果中也分离得到枸橘苷，采用硅胶、ODS、Sephadex LH-20和大孔吸附树脂柱色谱方法，分离得到枸橘苷等9个化合物。该方法操作繁琐，制备量小，收率低，不易工业化。

发明内容

本发明涉及一种提取纯化枸橘苷的方法，其纯度达到95%以上。本发明的目的是为了满足生产和科研上的需求量，提高收率，简化工序，降低成本。

本发明的目的是通过以下技术方案实现的：

一种提取纯化枸橘苷的方法，其特征在于：将柑橘属药材粉碎，用超临界二氧化碳作为萃取剂，在压力25-40MPa，温度45-65℃条件下进行萃取，萃取1-3h后解析，解析压力为5-8MPa，解析温度30-60℃，收集萃余物，将萃余物用水超声提取，提取液浓缩后，加乙醇调节醇浓度至70%-80%，离心，收集沉淀物，沉淀物用水溶解，上聚酰胺柱，先以去离子水洗脱杂质，再以40-55%乙醇洗脱，收集洗脱液，浓缩，浓缩液再经葡聚糖凝胶Sephadex LH-20分离纯化，石油醚-丙酮溶剂系统洗脱，洗脱液浓缩、结晶，异丙醚-丙酮重结晶，干燥得到枸橘苷白色晶体。

所述醇沉是将乙醇加入水浸膏中使醇浓度为70%-80%，加热至微沸，间歇性搅拌，静置半小时后离心，收集离心沉淀物。

所述聚酰胺为60-200目，用量与沉淀物之比为3:1-10:1，柱径高比为1:4-1:8。

所述Sephadex LH-20柱色谱梯度洗脱为：石油醚-丙酮以4:1-1:2进行梯度洗脱，TLC检测合并含有枸橘苷部分。

本发明提供的方法与现有技术相比，制备工艺简单、生产成本低，采用超临界萃取后再水提，提取率高，洗脱剂可回收循环使用，环境污染低。

具体实施方式

实施例1：

取10kg枳实药材粉碎至40目后装入超临界萃取釜，启动超临界二氧化碳泵，设定萃取温度为45℃，用少量超临界CO₂排尽系统内残留空气，然后设定萃取釜压力为30MPa，解析压力为8MPa，解析温度35℃，时间为60min后停止，减压卸料后萃取釜内余渣用5倍量水超声提取2次，每次30min，过滤后提取液合并，浓缩得到浸膏，加乙醇调节醇浓度至80%，加热保持微沸，间歇性搅拌，静置半小时后离心，收集离心沉淀物，将离心沉淀物上聚酰胺树脂柱层析，聚酰胺为60-100目，总用量与沉淀物之比为4:1，柱径高比为1:6，先以去离子水洗脱杂质，再以50%乙醇洗脱，收集洗脱液，浓缩，浓缩液再经葡聚糖凝胶Sephadex LH-20柱纯化，按石油醚-丙酮4:1-1:2进行梯度洗脱，TLC检测合并含有枸橘苷部分，浓缩析晶，滤出晶体，用异丙醚-丙酮重结晶，干燥得到枸橘苷330.8g，纯度97.3%。

实施例2：