[发明专利]一种老鼠瓜苷A的制备方法

说明书

技术领域

本发明属于中药领域，涉及一种老鼠瓜苷A的制备方法，特别是涉及一种应用高速逆流色谱法纯化老鼠瓜苷A的制备方法。

背景技术

刺山柑Capparis spinosa L.为白花菜科山柑属植物，又名老鼠瓜、野西瓜，主要分布于亚洲西部、欧洲、北美和大洋洲，我国主产西北干旱地区，新疆各沙漠区分布较多。其味辛苦，性温，具有祛风散寒、除湿、止痛、调经、消肿的作用，主要用于治疗风湿性关节炎和痛风。现代药理研究表明，老鼠瓜水提物具有保肝、降糖、降血脂、抗菌和清除自由基等作用。其抗菌消炎主要成分为糖苷类化合物，有corchoionoside C、spionoside A、spionoside B、老鼠瓜苷A等。

目前，对刺山柑的研究仍在起步阶段，尚未见老鼠瓜苷A工业生产方法的相关专利报道。

发明内容

本发明的目的是为了克服现有技术的不足，提供一种老鼠瓜苷A的制备方法，应用高速逆流色谱分离纯化老鼠瓜苷A，操作简单、产品纯度高。

为了实现上述目的，本发明的技术方案如下：

一种老鼠瓜苷A的制备方法，提取、脱色、柱层析、高速逆流色谱分离等步骤，具体步骤如下：

（1）提取：以刺山柑地上部分为原料，以乙醇溶液为提取溶媒，回流提取2-3次，过滤得到提取液；

（2）脱色：提取液中加入活性炭，在70℃下保温脱色30-60min，滤除活性炭，减压浓缩，回收乙醇，得到浓缩液；

（3）柱层析：浓缩液通过大孔吸附树脂柱，用水和40-60%乙醇洗脱，收集乙醇洗脱液，浓缩干燥得到老鼠瓜苷A粗品；

（4）高速逆流色谱分离：采用高速逆流色谱法对所得粗品进行分离纯化，制备得到老鼠瓜苷A。

所述步骤（1）中乙醇溶液浓度为60-75%。

所述步骤（2）中活性炭为药用活性炭，用量为药材质量的2-5%。

所述步骤（3）中的大孔吸附树脂为AB-8、HPD100或ADS-7型。

所述步骤（4）中高速逆流色谱法分离溶剂系统选用正己烷-乙酸乙酯-甲醇-水，体积比为（10-12）:（4-6）:（5-8）:（4-8），溶剂系统配制后静置分层，以上相为固定相，下相为流动相，流动相流速控制在1.5-3ml/min，主机转速控制在800-950r/min。

本发明的有益效果是：采用大孔吸附树脂和高速逆流色谱法分离纯化，工艺简单、成本低、产品含量高。

下面将结合具体实施方式进一步说明本发明，但本发明要求保护的范围并不局限于下列实施例。

具体实施方式

实施例1：

以刺山柑地上部分为原料，粉碎，取3kg，加入8L75%乙醇溶液，回流提取2次，过滤得到提取液，提取液中加入2%药材质量的药用活性炭，在70℃下保温脱色30min，滤除活性炭，减压浓缩，回收乙醇，得到浓缩液，通过AB-8型大孔吸附树脂柱，吸附完成后，先用水洗脱至无色，再用50%乙醇洗脱，收集乙醇洗脱液，浓缩干燥得到老鼠瓜苷A粗品，采用高速逆流色谱法对所得粗品进行分离纯化，按体积比为11:4:7:7配制正己烷-乙酸乙酯-甲醇-水溶剂系统，溶剂系统混匀后静置分层，以上相为固定相，下相为流动相，将固定相充满高速逆流色谱柱，开启主机转速调至800r/min，泵入下相作流动相，动态平衡后，流动相流速控制在1.5ml/min，将粗品溶于下相由进样阀进样，HPLC检测，收集目标成分，减压浓缩干燥流分，得到老鼠瓜苷A6.3g，含量97.8%。

实施例2：

以刺山柑地上部分为原料，粉碎，取3kg，加入7L60%乙醇溶液，回流提取3次，过滤得到提取液，提取液中加入5%药材质量的药用活性炭，在70℃下保温脱色60min，滤除活性炭，减压浓缩，回收乙醇，得到浓缩液，通过HPD100型大孔吸附树脂柱，吸附完成后，先用水洗脱至无色，再用40%乙醇洗脱，收集乙醇洗脱液，浓缩干燥得到老鼠瓜苷A粗品，采用高速逆流色谱法对所得粗品进行分离纯化，按体积比为10:4:7:5配制正己烷-乙酸乙酯-甲醇-水溶剂系统，溶剂系统混匀后静置分层，以上相为固定相，下相为流动相，将固定相充满高速逆流色谱柱，开启主机转速调至850r/min，泵入下相作流动相，动态平衡后，流动相流速控制在3ml/min，将粗品溶于下相由进样阀进样，HPLC检测，收集目标成分，减压浓缩干燥流分，得到老鼠瓜苷A5.2g，含量98.5%。

实施例3：