[发明专利]条石鲷性别特异分子标记及其遗传性别鉴定方法

权利要求书

1.条石鲷性别特异AFLP分子标记，其特征在于所述分子标记的引物序列如下：

5’- GACTGCGTACCAATTCACA -3’；

5’- GATGAGTCCTGAGTAACAT-3’，

用所述引物序列扩增出的特异AFLP标记经克隆测序为如SEQ ID NO:1所示的DNA片段。

2.条石鲷性别特异AFLP分子标记，其特征在于所述分子标记的引物序列如下：

5’-GACTGCGTACCAATTCAGA -3’；

5’-GATGAGTCCTGAGTAACTT -3’， 

用所述引物序列扩增出的特异AFLP标记经克隆测序为如SEQ ID NO:2所示的DNA片段。

3.条石鲷性别特异AFLP分子标记，其特征在于所述分子标记的引物序列如下：

5’-GACTGCGTACCAATTCATC -3’；

5’-GATGAGTCCTGAGTAACGT -3’， 

用所述引物序列扩增出的特异AFLP标记经克隆测序为如SEQ ID NO:3所示的DNA片段。

4.条石鲷性别特异AFLP分子标记，其特征在于所述分子标记的引物序列如下：

5’-GACTGCGTACCAATTCATG -3’；

5’-GATGAGTCCTGAGTAACTT -3’，

用所述引物序列扩增出的特异AFLP标记经克隆测序为如SEQ ID NO:4所示的DNA片段。

5.条石鲷性别特异SCAR分子标记，其特征在于所述分子标记根据SEQ ID NO:1序列设计引物进行PCR扩增获得，其引物序列为：

Opl240-1: 5’AGACCAAGATCAGGAGCGAAT3’；

Opl240-2: 5’GGAGCATCCCATCCATTCT3’，

用所述引物在雄鱼基因组中扩增出240bp的DNA条带，在雌鱼基因组中没有扩增条带。

6.一种根据权利要求5所述的条石鲷性别特异分子标记的遗传性别鉴定方法，其特征在于它包括以下步骤：

(1) 采集待测的条石鲷的基因组DNA；

(2) 用所述SCAR标记的引物对条石鲷基因组DNA进行PCR扩增，扩增得到240bp的条带所对应的为雄性个体，没有扩增条带所对应的为雌性个体。

7.根据权利要求6所述的一种条石鲷性别特异分子标记的遗传性别鉴定方法，其特征在于所述步骤(1)中采集条石鲷的鳍条提取基因组DNA。

8.根据权利要求6所述的一种条石鲷性别特异分子标记的遗传性别鉴定方法，其特征在于所述步骤(1)中所述的基因组DNA的浓度为50～200ng/μL，基因组DNA的纯度要求OD260/OD280值为1.76～1.80。

9.根据权利要求6所述的一种条石鲷性别特异分子标记的遗传性别鉴定方法，其特征在于所述步骤(2)中的PCR反应的体系为：DNA模板50～200ng，上下游引物浓度0.4μM，dNTP浓度为0.1mM，1×PCRbuffer，MgCl₂浓度为1.5mM，Taq酶1.25U，补充双蒸水至终体积25μL。

10.根据权利要求6所述的一种条石鲷性别特异分子标记的遗传性别鉴定方法，其特征在于所述步骤(2)中的PCR扩增程序为：94℃ 预变性5min，94℃变性30s，56℃退火30s，72℃延伸60s，共35个循环，最后72℃延伸10min。