[发明专利]可代谢己烯雌酚的假单胞菌及其应用

权利要求书

1.一种可代谢己烯雌酚的假单胞菌，其特征在于：可代谢己烯雌酚的假单胞菌(Pseudomonas sp.)J61，在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(CGMCC)登记保藏；保藏日期为2011年04月28日；编号为CGMCC No.4705。

2.一种权利要求1所述的可代谢己烯雌酚的假单胞菌的应用，其特征在于：可代谢己烯雌酚的假单胞能够降解己烯雌酚。

3.按权利要求2所述的可代谢己烯雌酚的假单胞菌的应用，其特征在于：所述假单胞降解己烯雌酚的降解步骤为：

(1)J61种子培养：将假单胞菌培养在LB培养基中，培养温度为28～30℃，培养转速180～200rpm/min，培养时间为10-16h；

(2)J61降解己烯雌酚：将步骤(1)中的J61菌体按起始浓度1.0×10⁸CFU/ml接种于含有己烯雌酚的最小培养基中进行培养，而后将培养物的上清液通过高效液相色谱(HPLC)检测剩余己烯雌酚的量，即可得到假单胞菌降解己烯雌酚的效率。

4.按权利要求3所述的可代谢己烯雌酚的假单胞菌的应用，其特征在于：所述HPLC的检测方法为：液相色谱仪：skyray LC-310液相色谱系统；色谱柱：Waters C18反向柱4.6×250mm，粒度5μm；检测条件为流动相，V(甲醇)∶V(水)＝85∶15；进样量为20μL；温度为25℃；紫外检测器检测参数为检测波长280nm。

5.按权利要求3所述的可代谢己烯雌酚的假单胞菌的应用，其特征在于：所述LB培养基为每升水中加入10g胰蛋白胨，5g酵母浸膏和10g氯化钠。

6.按权利要求3所述的可代谢己烯雌酚的假单胞菌的应用，其特征在于：所述最小培养基的配方为：每升水中加入1360mg磷酸二氢钾，1780mg磷酸氢二钠，500.08mg硫酸镁，500mg氯化铵，0.1mg氢氧化铝，0.05mg二氧化锡，0.05mg碘化钾，0.05mg氯化锂，0.05mg硼酸，0.1mg硫酸锌，0.01mg氯化钴，0.01mg硫酸镍，0.05mg氯化钡和0.05mg钼酸铵，pH，7.2±0.1。

7.按权利要求3所述的可代谢己烯雌酚的假单胞菌的应用，其特征在于：在含有己烯雌酚的最小培养基中进行培养的假单胞菌，取其上清液，加入等体积的乙醇，室温静止10min，在13,000rpm转速下离心5min，上清用0.22μm的滤膜过滤待用。